裸鼠鼻咽癌移植瘤对18F--FDG的摄取及其与ELAM--1基因表达的关系

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目的:  分别建立裸鼠鼻咽癌皮下及爪垫移植瘤模型并检测荷瘤裸鼠移植瘤组织中ELAM-1的表达。观察并比较转移组和非转移组荷瘤裸鼠经尾静脉注射18F-FDG后PET/CT分子成像扫描的区别并研究分析荷瘤裸鼠移植瘤SUVmax及T/NT值与ELAM-1的相关性。  方法:  (1)将鼻咽癌5-8F细胞悬液分别注射于裸鼠左后肢皮下及爪垫,观察裸鼠状态、成瘤情况并测量裸鼠体重及移植瘤长短径;  (2)造模后第8周,经尾静脉注射18F-FDG11MBq(300μCi)/只后1h进行18F-FDG PET/CT显像,由两位高年资的核医学医师观察评估图像质量并分别用ROI测定瘤体及对侧肌肉的SUVmax并计算T/NT比值,分析SUVmax及T/NT比值与移植瘤体积及ELAM-1蛋白表达的关系;  (3)结束后处死裸鼠并行病理检查,采用连续病理切片苏木精-伊红染色观察10只皮下及16只爪垫模型移植瘤细胞形态及淋巴结转移情况,根据HE染色结果将16只爪垫模型荷瘤裸鼠分为转移组和非转移组;采用免疫组织化学法(SP)检测两组移植瘤组织中ELAM-1蛋白的表达并使用Image J软件进行定量分析。采用独立样本t检验对转移组和非转移组进行组间分析,两变量之间关系研究采用相关性分析,(当P<0.05时,差异具有统计学意义)。  结果:  (1)10只皮下及16只爪垫荷瘤裸鼠均成瘤,成瘤率为100.0%,其中皮下模型中只有一只裸鼠出现了淋巴结转移,其余9只裸鼠均未见转移,转移率为10.0%;爪垫模型中9只裸鼠出现淋巴结转移,另外7只裸鼠未出现转移,转移率为56.3%;建模前,两组裸鼠初始体重差异无统计学意义[(18.50±1.39)g vs(18.56±1.77)g,t=-0.072,P=0.943≥0.05];  (2)绘制爪垫荷瘤裸鼠移植瘤生长曲线,16只裸鼠潜伏期约为7~14d,建模后4~7周,裸鼠瘤体体积呈指数增长,非转移组裸鼠瘤体体积小于转移组[(1216.07±365.73)mm3vs(1310.84±635.63)mm3,t=0.350,P=0.731≥0.05];  (3)免疫组化结果显示ELAM-1在鼻咽癌裸鼠移植瘤、淋巴结转移灶中的表达均为阳性,且主要表达于细胞膜。转移组移植瘤平均光密度值(MOD)高于非转移组(0.3440±0.1390vs0.0550±0.0063,t=6.230,P=0.000<0.05),差异有统计学意义;  (4)皮下移植瘤模型:18F-FDG PET/CT显像平均SUVmax为3.42±1.71,平均T/NT比值为4.36±3.72;SUVmax与裸鼠移植瘤体积没有明显相关性(r=0.212,P=0.557≥0.05),T/NT比值与裸鼠移植瘤体积有明显相关性(r=0.549,P=0.050<0.05);  (5)爪垫移植瘤模型:18F-FDG PET/CT显像转移组与非转移组平均SUVmax为(3.04±1.16vs2.67±0.69,t=0.747,P=0.467≥0.05);转移组与非转移组平均T/NT比值为(3.17±1.49vs2.89±0.66,t=0.515,p=0.616≥0.05);SUVmax与裸鼠移植瘤体积没有明显相关性(r=0.207,P=0.441≥0.05),T/NT比值与裸鼠移植瘤体积有明显相关性(r=0.185,P=0.493≥0.05);SUVmax与裸鼠移植瘤ELAM-1表达无明显相关性(r=0.150,P=0.580≥0.05),T/NT比值与裸鼠移植瘤ELAM-1表达无明显相关性(r=0.062,P=0.410≥0.05)。  结论:  (1)本研究成功构建稳定性好成瘤率高的荷鼻咽癌裸鼠皮下及爪垫移植瘤模型,其中爪垫模型转移率高(9/16),皮下模型基本不发生转移(1/10);  (2)ELAM-1在裸鼠移植瘤中高表达且转移组表达量高于非转移组,进一步说明了ELAM-1对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长和转移可能起到促进作用。  (3)临床型PET/CT可以很好地显示荷瘤裸鼠移植瘤代谢情况,皮下及爪垫移植瘤均有摄取,图像质量均能满足诊断需求。皮下移植瘤模型T/NT比值与裸鼠移植瘤体积有明显相关性,SUVmax与裸鼠移植瘤体积没有明显相关性;爪垫移植瘤模型转移组与非转移组SUVmax及T/NT比值差异无统计学意义,且SUVmax及T/NT比值与裸鼠移植瘤体积及ELAM-1表达均没有明显相关性,说明SUVmax及T/NT比值指标不能有效评估鼻咽癌转移等预后情况。
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