目的探讨环境氧分压改变对细胞自噬的诱导作用及其对乳腺癌MDA-MB-231细胞存活、增殖、迁移能力的影响。方法将MDA-MB-231细胞置于低氧条件下短期或长期培养,然后再给氧。Western Blot检测LC3-I、LC3-II和p62蛋白水平,用以判断细胞自噬活性的改变;流式细胞术分析线粒体含量,ROS水平和细胞凋亡。克隆形成实验检测细胞存活和增殖能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果首先,我们检测了EBSS培养条件下自噬相关标志的变化,发现LC3-II水平上升,而p62水平下降,证明体系的可靠性。在此基础上,我们系统分析了长期和短期缺氧及缺氧后再给氧所诱导的改变。结果显示:短期缺氧再给氧后,细胞自噬活性显著升高,线粒体含量和ROS产生增加,同时伴有细胞凋亡比例上升,而自噬激动剂能抑制细胞凋亡;长期缺氧后,细胞基础自噬水平显著升高,再给氧后自噬水平逐渐回复。克隆形成实验表明,缺氧再给氧后细胞克隆形成能力降低,而阻断自噬导致克隆形成进一步减少。此外,我们还发现细胞自噬水平增加伴有侵袭迁移能力的增强。结论短期缺氧后再给氧,细胞内受损线粒体增加,ROS水平升高,诱导了细胞自噬活性的上升,这种自噬可能有助于细胞的存活,在长期缺氧条件下,细胞自噬水平上升,再给氧后自噬逐渐降低至正常水平。无论是长期还是短期缺氧均导致细胞克隆形成能力降低。同时,自噬活性升高伴有侵袭能力的增加。