背景与目的：水泡性口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus，VSV)是运用于人类重大疾病基因治疗的主要病毒之一。基础研究已显示具有良好的抗肿瘤效应，然而完整病毒在肿瘤临床治疗中仍存在着生物安全隐患。VSV的基质蛋白(Matrix protein，M蛋白)是VSV病毒颗粒的结构蛋白，体外实验证明在缺乏VSV其他蛋白成分存在的情况下，可以直接诱导肿瘤细胞凋亡，独立执行完整病毒的抗肿瘤细胞作用。本课题利用VSV M蛋白的诱导凋亡作用探讨其在腹腔内肿瘤治疗中的作用。方法：本实验室构建了VSV M蛋白基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-M，简称为(P-M)，用阳性脂质体做转染载体。在体外细胞学实验中，用P-M转染鼠结肠癌细胞CT26，在相差倒置显微镜下观测细胞形态的变化，并用MTT检测细胞活性。在体内实验中，用鼠结肠癌细胞CT26细胞构建BALB／c小鼠腹腔内结肠癌种植模型，随机分4组：生理盐水(NS)组、脂质体(LIP)组、脂质体包裹PcDNA3.1(P3.1)组和脂质体包裹M蛋白基因(P-M)组，用腹腔内注射方法治疗，观测腹腔内肿瘤生长情况及各组生存情况，用GFP质粒观察阳性脂质体转染效率。在CT26结肠癌皮下模型上，用组织病理学技术观测各组肿瘤组织治疗后病理形态学改变，肿瘤细胞凋亡、增殖活性及血管密度变化。结果：体外试验P-M能够抑制CT26肿瘤细胞的生长，并诱导肿瘤细胞凋亡。经过P-M处理的CT26细胞的存活率在24h，48h，60h及72h分别为80.1％，62.22％，32.34％，6.06％，肿瘤细胞在24小时后活性逐渐降低，而各对照组细胞活性变化不大。腹腔注射脂质体包裹质粒具有良好的靶向性，在P-M组用RT—PCR检测到M蛋白的表达。P-M在小鼠结肠癌腹腔模型中能明显减少腹腔内转移肿瘤结节，能够延缓肿瘤的生长。NS组中位生存时间为18±1.89天，P-M组小鼠中位生存时间35±1.93天，明显延长荷瘤的生存时间。用TUNEL方法检测P-M组肿瘤细胞凋亡比其它各组明显增多，肿瘤细胞增殖活性(PCNA阳性率)降低，并具有统计学意义，但实验各组肿瘤组织内血管密度(CD31染色)未见明显差别。结论：1．在体外试验中，VSV M蛋白质粒转染细胞后引起了鼠结肠癌细胞病变，并引起肿瘤细胞凋亡。2．动物实验研究中，VSV M蛋白抑制鼠结肠癌腹腔内肿瘤的生长，明显延长荷瘤小鼠的生存时间。3．VSV M蛋白诱导肿瘤细胞大量凋亡，并抑制肿瘤细胞生长，肿瘤组织内新生血管未见明显抑制。4．VSV M蛋白在小鼠结肠癌腹腔模型中表现良好抗肿瘤效应，可能为转移性结肠癌的生物治疗提供了新的思路和方法。