【摘 要】
：
禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)是一类能导致禽类患多种肿瘤及免疫抑制性疾病的反转录病毒。根据其囊膜蛋白特性,目前ALV可分为A-K共11个亚群,其中ALV-J目前在国内最为常见。ALV-J感染主要引起鸡造血细胞恶性增生,诱发髓细胞瘤、血管瘤及严重的免疫抑制,严重制约国内外养禽业健康持续发展。ALV-K是近年在中国大陆地方品系鸡中分离鉴定出的新型禽白血病病毒。与其他外
论文部分内容阅读
禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)是一类能导致禽类患多种肿瘤及免疫抑制性疾病的反转录病毒。根据其囊膜蛋白特性,目前ALV可分为A-K共11个亚群,其中ALV-J目前在国内最为常见。ALV-J感染主要引起鸡造血细胞恶性增生,诱发髓细胞瘤、血管瘤及严重的免疫抑制,严重制约国内外养禽业健康持续发展。ALV-K是近年在中国大陆地方品系鸡中分离鉴定出的新型禽白血病病毒。与其他外源性ALV相比,尽管ALV-K复制能力偏弱,但其与其他亚群ALV混合感染的情况屡见不鲜。不同ALV亚群的共感染加大了 ALV重组进化的可能。另外,值得注意的是,目前ALV通用检测技术对ALV-K的检测效果不是很理想。国内急需高效特异检测ALV-K抗原及抗体的检测技术。为了创制ALV-K特异性诊断技术以及探究ALV-J与ALV-K亚群重组病毒致病潜力,本研究对ALV-K的gp85基因进行了克隆表达及其多抗制备,且利用ALV-K的env基因和ALV-J感染性克隆质粒构建了重组ALV病毒ALV-K-env-J1,在体内外开展了重组ALV病毒致病性研究。1.ALV-Kgp85基因克隆表达及多克隆抗体制备为获得用于制备抗ALV-K gp85基因单克隆抗体的免疫原和筛选用抗原,本研究分别将ALV-K的gp85基因以及erv基因分别克隆到原核表达载体pCold I以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-env。pCold-K-gp85转化BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达与SDS-PAGE分析发现,该Gp85重组蛋白主要表达在包涵体中。利用纯化后Gp85重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了抗ALV-K Gp85蛋白的多克隆抗体。间接免疫荧光(IFA)以及蛋白免疫印迹试验(Western blot)进一步证明,所获得的抗Gp85蛋白的多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-K-env质粒以及感染ALV-K的DF-1细胞内表达的Env蛋白。以上研究结果为进一步探究ALV-K宿主范围,细胞受体鉴定及亚群特异性诊断技术研究提供了材料。2.ALV-K-env-J1重组病毒构建拯救及致病性研究为了探究ALV-J与ALV-K亚群可能发生的重组及其致病潜力,本研究首先PCR扩增出ALV-K的env基因片段和ALV-J1感染性克隆线性化载体,构建重组感染性克隆质粒,再将重组质粒转染DF-1细胞,拯救出高效复制及表达ALV-K囊膜蛋白Env的重组病毒ALV-K-env-J1。野生型病毒ALV-K-GD与ALV-J1及重组病毒ALV-K-env-J1在DF-1细胞生长曲线结果表明,与ALV-J1和ALV-K-GD病毒相比,ALV-K-env-J1复制效率更高。SPF鸡感染性试验证明,与未感染组相比,感染组鸡均都表现出生长抑制特性。ALV-K-env-J1感染组鸡病毒血症阳性率、p27抗体阳性率及泄殖腔排毒量虽然低于ALV-J1感染组,但都显著高于野生型ALV-K-GD感染组。以上结果表明ALV-J与ALV-K的重组可显著增强ALV-K的复制能力及其致病性。
其他文献
尺寸完备性检查和公差设计与优化技术一直是CAD、CAPP与CAT领域的重要研究内容。随着计算机技术的快速发展和数字化工厂的逐步推进,产品制造信息逐步由传统二维标注的工程图纸向三维标注的数字化模型发展。三维尺寸标注作为数字化定义技术和无纸化设计与生产的关键环节,直接影响产品的加工、测量以及装配等各环节,实现尺寸标注信息的完备性检查与尺寸公差的优化设计对于提高产品设计效率与质量性能具有重要的意义。本文
在油井的生产过程中,钻、完井,修井等作业,可能引起近井地带储层污染、孔渗情况变差,导致层间矛盾加剧,进而影响产油量。储层污染后,酸化作业是改善渗流状况,恢复产能的有效措施。为了实现井下均匀布酸,常用的酸化技术有机械设备封堵分层酸化和化学工作液暂堵酸化,对于海上平台,由于受到空间、成本限制,宜选择作业流程简单,成功率高的化学工作液暂堵酸化方法。通过文献调研,发现使用成本低廉、容易获得的乳液暂堵剂能够
移动测量系统作为目前测绘界在地理信息获取方面最前沿的科技之一,能够实现三维空间地理信息数据的高精度、高效率的获取,逐渐成为测量、技术的典型代表。随着移动测量技术应用的不断深入,各个领域都对移动测量系统的精度提出了更高的要求。移动测量系统在测量过程中,需要借助定位定姿系统获得的高精度位姿信息,实现激光脚点由激光扫描仪坐标系到指定测图坐标系的转换。目前,移动测量系统的定位定姿系统主要采用全球导航卫星系
在自然界中,土壤、大气降尘以及地下水环境中存在着大量的重金属污染物,这些污染物一旦随着农作物、空气及牲畜水禽进入到人类的体内,就会造成不可逆转的后果,且不易排出体内。以往大多数学者对污染物迁移转化和吸附污染物的胶体迁移做了大量研究,且对于生物炭吸附污染物的研究甚多。然而,对于纳米生物炭在地下环境中的迁移研究较少,尤其当地下环境中存在重金属污染物时,纳米生物炭还能够影响重金属污染物的迁移,然而对于携
随着现代信息技术的迅猛发展及移动互联网的普及应用,第三方支付企业迅速崛起;但市场壮大的同时,产品同质化严重,恶性低价竞争普遍,第三方支付企业的生存和发展遇到了较大的压力。竞争力的提升依赖于低成本,而传统成本管理单纯对企业的内部作业进行成本管理,不能满足企业竞争的需求,企业必须把成本管理活动提高到战略的高度,实施战略成本管理,方可获得长久的竞争优势。本文以H支付公司为例,通过分析H支付公司当前的成本
在工业无损检测中,三维超声成像与传统的二维超声成像技术相比能够更加直观和准确的获得被检测材料的缺陷的空间位置、大小及形状,为进一步对缺陷进行修复与诊断提供了可靠依据。在飞机蒙皮的缺陷检测中,三维超声标定是进行缺陷检测不可或缺的步骤,是后续实现空间三维重建的基础。本文针对在飞机蒙皮进行无损检测中的超声相控阵三维空间标定技术中进行了研究,阐述了超声相控阵成像的相关原理及标定基本理论,然后着重对三维超声
随着“一带一路”倡议的实施推广和亚欧大陆桥建设的发展,亚欧大陆国家之间的合作逐渐加深,沿线国家之间的国际贸易往来比以往更加密切。中欧班列作为“一带一路”倡议实施的重要项目,为我国与沿线国家之间、沿线国家与沿线国家之间的贸易搭建起桥梁,打破了以往短距离铁路运输的格局,使得铁路运输网络日臻完善,极大的提高了沿线国家之间的贸易活力。与海运和空运相比,铁路运输具有运载量大,成本低,对天气依赖小,准时性强等
感知与认知心理学是心理学一重要分支,感知与认知心理学主要研究人的高级心理过程,诸如:知觉、触觉、思维、语言甚至是人脑对记忆的加工与信息处理过程。针对这一高级的心理学研究就需要有科学的理论基础和大量的数据来支撑,以证实研究的可靠性与真实性。因此,设计科学的心理学实验不仅可以在研究过程中得到大量的实验测试数据,同时其实验结果也是验证心理学基础理论的一项重要手段。但是-些感觉知觉心理学实验受制于实验设备
近年来,内存泄漏、缓冲区溢出等内存漏洞频发,尤其是对于C和C++之类的内存不安全语言来说,更容易受到内存脆弱性的影响,从而导致难以预料的系统崩溃。这些脆弱性一旦被恶意攻击者利用,就会产生严重的后果。此外,由于程序员的疏忽导致的代码低效行为更是屡见不鲜,这些行为虽然不会带来致命的后果,但是会严重影响程序的执行效率。更有甚者会利用系统本身的特性进行恶意攻击,从而获取内存中的敏感信息,如近几年爆发的幽灵
目前,在铝液的生产过程中,依靠人工调度方式对铝电解车间的多功能机组进行调度,经常出现多功能机组的利用率不高、忙闲不一致以及对于突发事件的响应不及时等问题,导致多功能机组的损坏不一致、增加多功能机组维护量,加大了企业投资成本。因此,多功能机组的合理调度对铝液安全稳定生产以及铝电解车间生产效率的提高有着至关重要的作用。本文把铝电解车间的多功能机组看做是移动的工作台,应用博弈理论研究铝电解车间多功能机组