论文部分内容阅读
目的:检测Caspase-3、Adipoq、β-catenin、LRP5、BMP-2 m RNA在幼兔激素性股骨头缺血坏死动物模型股骨头组织中的表达,探讨Wnt/β-catenin信号通路与幼兔激素性股骨头缺血坏死的关系。方法:选取8周龄健康新西兰幼兔35只,体重均在1.1~1.9Kg之间。随机分为激素注射组25只,对照组10只。前者臀肌注射醋酸泼尼松龙(剂量标准7.5mg/kg),一周2次;后者注射等量的生理盐水,两组各注射8周。分别于注射后4、8周末时行双侧髋关节X线正位片、CT检查,注射8周后全部实验动物予以处死并立即取出双侧股骨头,一部分存于-80°冰箱用于RT-PCR检测,另一部分制成蜡块用于病理学检查。根据X线、CT检查及病理学结果判断发病与否把激素注射组再分成发病组和未发病组。用RT-PCR方法检测Caspase-3、Adipoq、β-catenin、LRP5、BMP-2 m RNA在各组股骨头中的表达情况,比较各相关基因在各组中的表达差异。结果:1.激素注射组动物中存活22只,6只实验动物被认为发生股骨头坏死,未发病16只,实验组股骨头坏死发生率为27.3%(6/22)。2.X线及CT表现:在发病组中股骨头广泛骨质疏松,出现囊状透光区,囊状透光区边缘模糊不清;表面轻度变扁,不同程度的塌陷;骨小梁界限模糊紊乱、存在部分中断及坏死区。3.组织病理学情况:激素组骨小梁排列稀疏,断裂较多,部分缺失;骨细胞数目减少,核固缩;可见较多的脂肪细胞;骺板细胞不规则排列,核缺失较明显。4.RT-PCR显示:β-catenin在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为0.22±0.01、0.35±0.09、1.07±0.41,发病组与未发病组、对照组比较,差异有统计学意义(t=4.94,10.60,P<0.05);LRP5在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为0.22±0.05、0.35±0.12、1.12±0.36,发病组与未发病组、对照组比较,差异有统计学意义(t=4.39,9.93,P<0.05);Adipoq在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为17.84±5.51、3.33±1.26、1.11±0.27,发病组与未发病组、对照组比较,差异有统计学意义(t=5.88,12.01,P<0.05);Caspase-3在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为3.10±0.90、1.29±0.35、1.06±0.24,发病组与未发病组、对照组比较,差异有统计学意义(t=7.15,7.75,P<0.05)。BMP-2在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为0.08±0.05、0.31±0.21、1.12±0.32,发病组与未发病组、对照组比较,差异有统计学意义(t=2.93,8.08,P<0.05)。在对照组、未发病组及发病组中,β-catenin与LRP5的表达均呈正相关关系(r=0.779,0.914,0.885,P=0.008,0.020,0.019);Caspase-3与β-catenin呈负相关关系(r=-0.782,-0.839,-0.838,P=0.008,0.022,0.026);Caspase-3与LRP5呈负相关关系(r=-0.769,-0.863,-0.878,P=0.009,0.032,0.022);Adipoq与β-catenin呈负相关关系(r=-0.733,-0.702,-0.736,P=0.016,0.006,0.036);Adipoq与LRP5呈负相关关系(r=-0.749,-0.607,-0.756,P=0.013,0.023,0.043);BMP-2与β-catenin呈正相关关系(r=0.708,0.622,0.844,P=0.022,0.010,0.035);BMP-2与LRP5呈正相关关系(r=0.521,0.701,0.777,P=0.023,0.021,0.022)。结论:1、Wnt/β-catenin信号通路在激素性股骨头缺血坏死动物模型中受到一定程度的抑制。2、糖皮质激素对Wnt/β-catenin信号通路的抑制可能诱发了股骨头骨和软骨细胞的凋亡以及脂肪细胞的形成,抑制其成骨能力。