丹参酮ⅡA对复苏后大鼠脑N-甲基-D-天冬氨酸受体1亚单位(NMDAR1)表达的影响及脑保护作用

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目的:探讨丹参酮ⅡA对大鼠心肺复苏后脑N-甲基-D-天冬氨酸受体1亚位(NMDAR1)表达的影响及对脑组织保护作用。方法:将78只SD雄性大鼠随机分为3组:A组(假手术组,n=6),B组(对照组,n=36),C组(丹参酮ⅡA干预组,n=36),通过制备窒息致大鼠心脏骤停动物模型,C组复苏即刻予以丹参酮ⅡA15mg/kg静脉推注,B组予以等量生理盐水静脉推注。监测A组术后、B和C组自主循环恢复(ROSC)后60min内平均动脉压(MAP)的变化;在ROSC后1、6、12、24、48、72h断头取脑,应用免疫组织化学染色法检测脑组织NMDAR1、半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(Caspases-3)、水通道蛋白-4(AQP4)的表达,干湿重法测脑组织含水量。采用SPSS17.0软件进行统计学处理,实验结果组间比较采用单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果:①各组基础状态下呼吸、体重、心率及MAP的变化,差异无统计学意义(P>0.05)。②B组在ROSC后1h脑NMDAR1蛋白表达明显增高,6h达到高峰,12h逐渐降低,24h仍高于正常,在48h表达低于正常,72h更低,与A组比较有显著差异(P<0.05);C组1h、6h、12hNMDAR1蛋白的表达与同时间点B组比明显降低(P<0.01),但24h、48h、72hNMDAR1蛋白的表达无明显差异(P>0.05)。③B组Caspases-3蛋白表达在ROSC后呈上升趋势,48h达高峰,后逐渐降低,但72h仍高于正常,与A组比较差异明显(P<0.01);C组在1h、6h、12h、24h明显低于B组(P<0.01),48h、72h表达仍低于B组(P<0.05)。④B组脑AQP4蛋白表达在ROSC后1h就开始升高,24h达高峰,48h逐渐降低,72h仍高于正常,与A组比较有明显差异(P<0.01或P<0.05);与B组比较,C组脑AQP4蛋白的表达6h、24h、48h、72h明显降低(P<0.01),在1h、12h亦有所降低(P<0.05)。⑤B组大鼠脑组织含水量在ROSC后1h就明显升高,24h达高峰,48h逐渐降低,但72h仍高于正常,与A组比较有明显差异(P<0.01或P<0.05);与B组比较,C组含水量明显降低(P<0.01)。结论:1.ROSC后1h脑Caspases-3、AQP4的表达及脑水肿就有明显增加,且24h至48h脑损伤最重,72h仍未能恢复正常。2.ROSC后1hNMDAR1迅速增高,在6h达到高峰,早期NMDA受体参与脑组织损伤的介导过程;12hNMDAR1表达逐渐下降,并于48h低于正常,而48h脑Caspases-3、AQP4的表达仍在高峰期,后期NMDA受体低表达是否参与脑损伤尚不明确。3.丹参酮ⅡA对大鼠心肺复苏后早期NMDAR1的表达有下调作用,能明显减少复苏后脑Caspases-3、AQP4的表达及脑水肿,对脑组织起保护作用。
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