两种铜矿废弃土壤微生物的研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:houyangpeng
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矿业废弃地是指因在采矿活动中而破坏、占用和污染最终导致无法治理或无法使用的土地,常分为尾矿废弃地、废石场和采空塌陷三种类型。矿业废弃地生态系统的恢复,不仅仅指地上部分植被的覆盖,同时也包括基质中土壤微生物群落结构的恢复。本研究选取安徽铜陵凤凰山相思谷铜尾矿废弃地和狮子山铜矿废石场废弃地两种不同类型铜矿业废弃地为研究对象,分析测定了两种铜矿业废弃地的理化性质、重金属含量和基质土壤酶活性,利用高通量测序技术测定了不同季节下土壤细菌群落的组成结构和丰度,并采用光学显微镜和电子显微镜对铜废石场废弃地自然定居的植物根际丛枝菌根(AM)真菌进行了分离鉴定,探讨影响铜矿业废弃地土壤细菌群落的环境因素以及两种不同铜矿废弃地微生物群落结构的差异,为矿业废弃地土壤生态系统的恢复和重建提供理论依据。主要研究结果如下:  1、通过两种铜矿业废弃地基质理化性质分析结果发现,基质营养成分低、重金属铜含量极高是铜矿业废弃地上植物不能或难以定居的主要因子,同时也是影响铜矿业废弃地微生物种类和群落结构的重要因子。其中狮子山铜矿废石场废弃地基质的全氮、全磷、有机质含量约是凤凰山尾矿废弃地的3.26,1.81和1.67倍,狮子山铜矿废石场废弃地重金属全铜的含量高达7512.30 mg/kg,系凤凰山铜尾矿废弃地的3.34倍。矿业废弃地中总量重金属复合污染对土壤酶活性具有明显的抑制作用,植物的定居有助于提高土壤酶的活性,其中狮子山铜矿废石场废弃地中基质土壤酶活性要高于凤凰山铜尾矿废弃地;  2、通过高通量测序技术对两种矿山废弃地土壤细菌进行了研究,其中秋季矿山废弃地共获得基因序列223706条,在97%相似水平上聚类共得到1909个OTUs,主要分布在25个已知细菌门,32个已知细菌纲以及160个已知细菌属。其中铜尾矿废弃地中优势细菌门(相对丰度>5%)有5个,分别为 Proteobacteria(变形菌门), Acidobacteria(酸杆菌门),Chloroflexi(绿弯菌门),Bacteroidetes(拟杆菌门)和Parcubacteria;铜废石场废弃地中优势细菌门有6个,分别为Proteobacteria(变形菌门),Acidobacteria(酸杆菌门),Chloroflexi(绿弯菌门),Actinobacteria(放线菌门), Verrucomicrobia(疣微菌门)和 Bacteroidetes(拟杆菌门)。其中 Proteobacteria, Acidobacteria,Chloroflexi和Bacteroidetes为秋季在两个矿山废弃地中的优势细菌门。  夏季矿山废弃地高通量测序共获得基因序列138803条,在97%相似水平上聚类共得到2685个OTUs,主要分布在21个已知细菌门,31个已知细菌纲以及109个已知细菌属。其中铜尾矿废弃地中优势细菌门有3个,分别为 Proteobacteria(变形菌门),Acidobacteria(酸杆菌门)和Actinobacteria(放线菌门);铜废石场废弃地中优势细菌门有5个,分别为Proteobacteria(变形菌门),Acidobacteria(酸杆菌门),Bacteroidetes(拟杆菌门),Gemmatimonadetes(芽单胞菌门)和Verrucomicrobia(疣微菌门)。其中 Proteobacteria和 Acidobacteria为夏季在两个矿山废弃地中的优势细菌门。  3、土壤细菌相对丰度受土壤理化性质、土壤酶和重金属元素的影响。Acidobacteria(酸杆菌门),Bacteroidetes(拟杆菌门)和 Actinobacteria(放线菌门)的相对丰度与土壤理化性质具有较好的相关性;蛋白酶与各优势细菌门之间具有较好的相关性;重金属Cu和Cr与Acidobacteria(酸杆菌门),Bacteroidetes(拟杆菌门)和 Armatimonadetes的相对丰度呈显著的负相关,与 Actinobacteria(放线菌门), Chloroflexi(绿弯菌门)和Proteobacteria(变形菌门)的相对丰度呈正相关性,但重金属Pb、Zn和Cd与上述细菌门的相关性正好相反,说明不同细菌对重金属的耐受性不同,重金属元素对细菌的生长繁殖存在一定的选择性;不同重金属元素对土壤细菌类群的影响不同,但同一重金属总量与有效态对土壤细菌门的影响是一致的。  4、铜废石场废弃地中海州香薷(Elsholtzia splendens)、茵陈蒿(Artemisia capillaries)和鸭跖草(Commelina communis)均能与AM真菌形成良好的共生关系,根际存在明显的AM真菌定殖和侵染情况。在铜矿废石场废弃地植物根际土壤中用光学显微镜共分离出22种AM真菌孢子,其中球囊霉属13种,无梗囊霉属6种,管孢囊霉属2种和盾巨孢囊霉属1种;电子显微镜下共分离鉴定出14种真菌孢子,其中球囊霉属11种,无梗囊霉属3种,球囊霉属和无梗囊霉属是该地区的优势属,光学显微镜下所分离出的22种AM真菌在不同植物根际出现的频率不同,说明宿主植物对AM真菌群落组成的影响较大。铜尾矿废弃地自然状态下未调查到植物定居,因此未进行AM真菌孢子的分离与鉴定,但土壤细菌类群丰富,铜尾矿废弃地土壤细菌群落结构的多样性对地上植被的重建和恢复提供了一定的潜力。
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