木霉菌(Trichoderma spp.)对林木病害生防机制的研究

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本研究以哈茨木霉菌株T88为供试菌株,通过对峙培养、电镜观察及酶活性测定等方法对其代谢物质的抗菌活性、重寄生及其水解酶、以及诱导杨树的防卫反应等进行了研究,旨在阐明其对林木枝干病害的生防机制,对于它在林木病害生防上的应用,具有重要的理论和现实意义。 主要研究结果如下: 1.木霉菌T88菌株在代谢中产生了挥发性和非挥发性抗生物质,挥发性代谢物能不同程度的抑制杨树烂皮病菌(C.chrysosperma)、杨水泡溃疡病菌(Dothiorella gregaria)、苹果腐烂病菌(C.mail)等多种病菌菌落生长,T88对C.chrysosperma的抑制率在72h达38.6%。随培养时间的延长,T88对几种病菌的抑制作用逐渐增强。非挥发性代谢物质同样也可抑制这些病原菌菌丝的干重,在浓度为50%、100%时,过滤灭菌的培养液中C.chrysosperma的菌丝干重分别降低了49.33%、96.38%;而湿热灭菌的处理C.chrysosperma的菌丝干重分别为59.28%、96.61%。 2.木霉菌T88对不同的病原菌重寄生作用方式不同,T88菌丝螺旋状缠R.solani菌丝,并产生钩状分支。在C.chrysosperma的菌丝上平行或波浪式生长或穿透病原菌的菌丝生长。在木霉菌T88与D.gregaria的载片对峙培养中,T88可以使病菌苗丝断裂,原生质浓缩。 3.木霉菌T88在以胶状几丁质、茯苓粉为碳源的培养基中,产生了水解几丁质和葡聚糖的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶,平板中出现水解透明圈。在对峙培养中,对峙区产生了高活性的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶,酶活性分别为76.92 U/mgPro、18.20U/mgPro。 4.用不同的碳源培养T88产生的酶水平不同。在以R.solani菌丝细胞壁为碳源的培养液中,T88的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性最高,分别为43.55 U/mgPro、24.52U/mgPro;在2%葡萄糖为碳源的培养液中,没有检测到这两种酶活性。 5.培养时间对T88的产酶有一定影响。T88在R.solani菌丝细胞壁诱导下,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性升高,并于第2d达到高峰,随后酶活性持续降低。 6.T88的培养液用90%饱和硫酸铵沉淀后,得到的粗酶液对R.solani和C.chrysosperma菌丝生长都有抑制作用。在孔的周围出现抑菌带,而且200ul的粗酶液的抑菌作用大于100μl的抑菌作用。 7.利用T88对毛白杨水培枝条进行诱导接种,可以激发杨树枝条的防卫反应。其与防卫反应有关的POD酶、PAL酶、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶酶活升高。
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