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本实验从日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺中调取出编码类sorcin蛋白的目的基因L249,克隆到pET23b载体中后,对类sorcin蛋白进行原核及真核诱导表达,利用亲和层析进行蛋白纯化,以纯化后的类sorcin蛋白作为抗原,制备兔抗七鳃鳗多克隆抗体。用ELISA的方法测出效价后,应用该多克隆抗体,在七鳃鳗的主要免疫器官中进行类sorcin蛋白的免疫组化定位,以便研究免疫器官的结构和类sorcin蛋白的分布情况,为进一步研究免疫器官在类sorcin蛋白活性中的作用和应用类sorcin蛋白研制药用新靶点奠定理论基础。类sorcin蛋白的诱导表达结果表明:类sorcin蛋白在大肠杆菌BL21菌株和Rosetta-BL21菌株中均为包涵体过表达形式。并且,类sorcin蛋白在Rosetta-BL21菌株中的表达量要比在BL21菌株中大。另外,在酵母中尚未看到类sorcin蛋白的真核表达形式。用BCA法测定所得的诱导表达蛋白浓度的结果表明:纯化后的类sorcin蛋白的浓度可达到1.16 mg/mL。用ELISA方法检测兔抗七鳃鳗多克隆抗体的结果表明:所制备的抗体效价值比较高,可达到1:12000。用Western-blot的方法对类sorcin蛋白进行定位分析的结果表明:从口腔腺中提取出的天然蛋白的条带位置和纯化后的重组蛋白的位置并不完全一致。对类sorcin蛋白进行免疫组化研究的分析结果表明:日本七鳃鳗消化系统组织形态结构特点与其特殊的进食方式和进化地位密切相关。类sorcin蛋白在日本七鳃鳗的肠、心脏、肝脏、生殖腺及口腔唾液腺等免疫器官中均有分布,并且分布的表达量各不相同。其中在心脏中的分布量很丰富,这与sorcin蛋白的主要活性之一:影响心肌细胞的兴奋——收缩偶联是相关的。正常心肌细胞中,sorcin与细胞内钙释放通道RyR能广泛协同定位,而在心肌病的心肌细胞中,这种协同定位的能力被破坏。目前研究人员通过对心肌蛋白进行协同定位和体外结合实验,已经明确sorcin能够完全抑制心肌RyRs通道的开放,并且这种抑制作用会因PKA催化亚单位磷酸化而减弱。因而,sorcin通过激活钙离子-ATP酶,恢复肌浆网中钙离子浓度,可能在维持钙离子动态平衡和调节心肌病心肌功能紊乱中起着重要的代偿作用。本实验为研究类sorcin蛋白的细胞活性和蛋白功能奠定一定的理论基础。