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目的:(1)观察转化生长因子β1(TGF-β1)对结肠癌细胞株SW620、SW480、HT29、HCT116、LS174T细胞凋亡的影响;选用敏感细胞观察活性caspase-3是否参与了凋亡过程;(2)探讨活性caspase-3、P38信号通路在TGF-β1诱导结肠癌细胞凋亡过程中的作用,揭示TGF-β1诱导结肠癌细胞凋亡的可能机制。方法:以结肠癌细胞株SW620、SW480、HT29、HCT116、LS174T为研究对象:(1)用流式细胞术检测10ng/ml TGF-β1作用48小时对这5株细胞凋亡率的影响;(2)根据细胞株对TGF-β1的不同敏感性选取SW620细胞株进行下一步实验,分别以不同浓度的TGF-β1(0、5、10、15ng/ml)刺激48h,用DAPI染色法观察在不同浓度的TGF-β1作用下细胞凋亡情况,并用Western blot检测活性caspase-3表达的变化情况;(3)选取TGF-β1的最大诱导凋亡浓度10ng/ml,用Western blot检测不同时间点(0、6、12、24、48h)活性caspase-3表达的变化情况,用流式细胞术观察SW620细胞在不同时间点的凋亡率;(4)将其分为空白组、加入TGF-β1(10ng/ml)组、以及用特异性抑制剂SB203580预处理组,用Western blot检测相同时间活性caspase-3表达的变化情况;以及SB203580预处理组在不同时间点细胞活性caspase-3表达的变化情况,并用caspase-3分光光度法检测caspase-3的活化程度;(5)用10ng/ml TGF-β1分别刺激SW620细胞不同时间(0,30,60,120min)后,Western blot检测p-p38MAPK表达水平的变化。结果:(1)SW620对TGF-β1相对敏感,且呈时间剂量依赖性,而SW480、HT29、HCT116、LS174T相对不敏感。(2)将SW620细胞分为3组(分别为空白组、10ng/mlTGF-β1组、SB203580+10ng/mlTGF-β1组)进行处理,结果显示SB203580预处理组的活性caspase-3表达水平明显降低,TGF-β1预处理组的凋亡率明显增加。(3)10ng/ml TGF-β1作用SW620细胞0,30,60,120min后,SW620细胞的p-p38MAPK蛋白的表达明显增高。结论:(1)不同结肠癌细胞株对TGF-β1诱导的细胞凋亡有不同的敏感性:SW620对TGF-β1相对敏感,而SW480、HT29、HCT116、LS174T相对不敏感。(2)外源性TGF-β1部分经过了P38通路诱导结肠癌SW620细胞株凋亡。