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NAFLD是主要的现代文明病之一,严重危害人体健康。全球NAFLD的发病率约为20~30%,并且增长迅速,目前已成为全球最普遍的肝脏疾病。在NASH的形成过程中,肝细胞凋亡起着重要的作用,且肝细胞的凋亡水平和肝组织的炎症程度有着密切的关系。所以,通过各种手段来降低肝细胞的凋亡水平,可以改善肝组织的炎症反应,延缓或阻止NASH的进程。研究目的:观察耐力游泳运动对高脂膳食诱导大鼠NASH形成过程中大鼠血清FFA、TNF-α及肝组织凋亡相关蛋白的表达,探讨运动在预防NASH形成过程中对肝细胞凋亡与肝细胞炎症的影响规律,为运动预防和改善NASH提供一定的理论依据。研究方法:Sprague-Dawley(SD)纯系4周龄雄性大鼠84只,按膳食方式不同分为两大组:普通膳食喂养组(普通组)和高脂膳食喂养组(高脂组)。两组按是否有运动干预又分为安静组和运动组两个亚组,共计4个亚组,分别为普通膳食安静组(C组)、普通膳食运动组(E组)、高脂膳食安静组(H组)、高脂膳食运动组(HE组)。各组大鼠取材时间为实验4周、8周和12周。制备肝组织常规石蜡切片进行肝细胞脂肪变性等级与炎症程度评分;Western Blot方法测定肝脏Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达;流式细胞术检测肝细胞凋亡率。研究结果:(1)日平均摄入热量:各实验阶段,日平均摄入热量H组均高于C组(P<0.01),E组均低于C组(P<0.01),HE组均高于E组(P<0.01),HE组均低于H组(P<0.01)。(2)体重与肝重:实验4周和12周阶段,体重H组均高于C组(P<0.01);实验8周和12周时,E组均低于C组(P<0.05),HE组均低于H组(P<0.05)。各实验阶段大鼠肝重H组均高于C组(P<0.01),HE组均高于E组(P<0.01),且HE12组低于H12组(P<0.05)。(3)血清学指标:各实验阶段,血清FFA浓度H组均高于C组(P<0.05),HE组均低于H组(P<0.05);实验8周和12周阶段,E组均低于C组(P<0.01),且HE12组低于H12组(P<0.01)。血清ALT仅H12组高于C12组(P<0.01)。血清TNF-α水平结果为H12组高于C12组(P<0.01),HE12组低于H12组(P<0.05)。(4)肝细胞凋亡率:各实验阶段,肝细胞凋亡率H组均高于C组(P<0.05);运动能使高脂膳食大鼠凋亡率下降,且HE12组低于H12组(P<0.01)。(5)肝组织凋亡相关蛋白:肝脏Caspase-3与Bax蛋白表达均表现为H8组高于C8组(P<0.05);H12组高于C12组(P<0.01),HE12组高于E12组(P<0.01),E12组低于C12组(P<0.05),HE12组低于H12组(P<0.01)。肝脏Bcl-2蛋白表达H4组低于C4组(P<0.05),HE4组低于E4组(P<0.05);H8组低于C8组(P<0.01),HE8组低于H8组(P<0.01); H12组低于C12组(P<0.01),E12组高于C12组(P<0.05),HE12组高于H12组(P<0.01),HE12组低于E12组(P<0.01)。(6)肝细胞脂肪变性与肝细胞炎症活动度评分:肝细胞脂肪变性结果显示,各实验阶段H组均高于C组(P<0.01),HE组均高于E组(P<0.01),H组均高于HE组(P<0.01),其中H12组高于HE12组(P=0.068)。各实验阶段肝组织炎症活动度评分C组均低于H组(P<0.01),其中HE8组低于H8组(P=0.055),HE12组低于H12组(P<0.01)。结论:1.12周的高脂膳食可以成功复制大鼠NASH模型,其机制可能是高脂膳食导致了大鼠血清FFA增高引起肝细胞脂质化,并促进肝细胞凋亡和肝组织发生炎症反应;2.耐力游泳运动能有效缓解高脂膳食大鼠NASH的发展和改善NASH的症状,其机制可能是通过限制热量的摄入、降低血FFA、减少肝细胞对脂质的积累,同时抑制肝细胞凋亡从而延缓NASH的进程并减轻肝组织炎症活动;3.在高脂膳食诱导的NASH形成过程中,肝细胞凋亡可能是促使肝脏单纯脂肪变性发展成为NASH的一个重要原因。