罗布麻化学成分及抗炎活性研究

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研究背景:罗布麻,为夹竹桃科多年生宿根植物,植物全株可入药,药用历史可追溯千年,具有抗高血压、高血脂、抗抑郁、抗焦虑、强心等心脑血管保护作用。随着人们对生活质量要求的提高,罗布麻茶在亚洲及北美洲已经成为一种流行的保健饮品,尽管罗布麻茶的物质基础尚不清楚,但其在改善消化道功能障碍、抗炎、抗高血压方面的作用备受人们重视。研究方法:罗布麻干燥叶经95%乙醇加热回流得提取物后,通过柱层析,薄层层析(TLC),高效液相色谱(HPLC)等分离手段纯化单体成分,然后通过UV、IR、MS及NMR等手段鉴定其化学结构,并通过NO抑制实验筛选抗炎活性较好的单一成分。进一步通过脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞模型及葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎小鼠模型探讨其抗炎作用及作用机制。结果:从罗布麻中分离纯化并鉴定得到12个单体化合物,分别为羽扇豆醇、β-香树素、β-谷甾醇、白桦醇、白桦酸、乌发醇、胆甾醇、邻苯二甲酸二丁酯、甲氧生育酚、(2S)-2,3-O-dioctadeca-9Z,12Z,15Z-trienoylglyceryl-O-β-D-galactopyranoside、2-alinolenoylglycerol-1-O-b-D-galactopyranoside以及2(R)-1-O-octadecanoyl-2-O-(9Z,12Z,15Z-octatrienoyl)-3-O-β-D-galactopyranosyl glycerol共12种单体化合物。其中白桦醇、白桦酸、乌发醇、胆甾醇、邻苯二甲酸二丁酯、甲氧生育酚以及3种半乳糖脂,共9种化合物在罗布麻中首次获得。通过抗炎活性筛选,NO抑制实验显示乌发醇具有较好的抗炎活性;其可显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中炎症介质(IL-6,IL-1β,TNF-α和MCP-1)mRNA的表达和产生,有效降低iNOS和COX-2蛋白质表达,以及STAT3和ERK的磷酸化;在DSS诱导的结肠炎小鼠中,乌发醇可以显著降低小鼠疾病活动指数(DAI)水平,减少结肠的缩短,降低结肠组织损伤程度及MPO的活性;此外,乌发醇还可以显着降低结肠炎小鼠结肠组织中巨噬细胞的浸润及炎症介质(TNF-α,IL-6,IL-1β和MCP-1)mRNA的表达和产生,同时抑制p-STAT3和p-ERK的表达。结论:从罗布麻中分离纯化并鉴定得到12个单体化合物,其中9种化合物在罗布麻中首次获得,丰富了罗布麻的化学结构类型,为其物质基础研究奠定了基础;并从中筛选发现乌发醇具有良好的抗炎活性,并对DSS诱导的实验性结肠炎和LPS刺激的RWA264.7巨噬细胞具有有效的抗炎作用,为拓展罗布麻新药理作用,以及促进罗布麻资源的的综合利用提供了科学依据。
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