禽流感病毒抗原纯化方法的建立及纯化抗原对鸡体免疫效果研究

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为了适应大生产的要求,本试验建立了以抗原毒株的克隆化、抗原预处理、低速离心除杂、高速离心除杂、浓缩、层析纯化为主的禽流感抗原纯化方法,有效降低抗原中的杂质含量和杂蛋白含量。用纯化抗原制备疫苗常规抗原与纯化抗原按既定试验方法进行乳化配制疫苗,纯化疫苗与常规疫苗比较物理外观性状基本相同,但通过颗粒度检测纯化疫苗颗粒度更为细小,更有利于鸡体吸收。抗体产生的要高,而且维持的时间要长,常规苗20周左右已经不再产生抗体,纯化抗原制成的疫苗在29周时还维持在一个较高水平,疫苗的效力检验检验显示:疫苗的效力检验检验显示:三组疫苗接种后在第10、14、21、40天各组抗体几何平均滴度水平依次为常规疫苗组:9.01Log2 ;抗原b剂量纯化疫苗组:8.92 Log2 ;抗原c剂量纯化疫苗组:10.42 Log2。三组疫苗SPF鸡胸部肌肉注射1ml疫苗后第6天,三组疫苗接种鸡接种部位均有肉眼可见的不同程度疫苗未完全吸收现象,纯化疫苗1、2组局部有红肿,沿注射方向出现散在出血点。第25天剖检,纯化疫苗1、2组疫苗基本吸收,肌肉组织恢复较好,常规疫苗组疫苗没有被完全吸收,注射部位及其周围局部略有黄色粘稠状液体,有少量出血点。对照组第9天剖检,注射部位有轻微充血和出血,但不明显,抗原完全吸收,肌肉未见异常。
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