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马齿苋(Portulaca oleracea L.)是我国古老的药食兼用植物。近年来,马齿苋以其丰富的营养、独特的药理作用以及药食兼用的特性,日益受到广泛的关注。研究表明,马齿苋具有调血脂、抗动脉硬化、抗肿瘤、抗衰老、降血糖等多种药理活性。多糖作为一种重要的生命物质,具有多种生物活性,特别是抗肿瘤、免疫调节作用受到广泛关注。本论文以马齿苋为原料,研究马齿苋多糖的提取、分离纯化及其体内免疫活性、体外抑瘤作用和抗氧化活性,为功能食品和药品的研究开发提供基础,为马齿苋的开发利用提供新途径。本论文的主要研究内容和结果如下:1、研究了马齿苋粗多糖的水提法优化工艺。采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,以多糖提取率为考察指标,进行单因素实验,考察固液比、温度、时间、提取次数等因素对提取率的影响。在此基础上,进行正交试验,优化水提法工艺条件。水提法优化工艺条件为温度100℃、时间2h、固液比1:15、提取次数4次,此条件下多糖提取率达94.26%,粗多糖得率为15.50%,多糖含量为22.60%。2、研究了马齿苋多糖的分离纯化工艺,测定了多糖组分的分子量,分析了其单糖组成。(1)比较分析了大孔树脂吸附法、H2O2法以及活性炭吸附法三种脱色方法对马齿苋水提液的脱色效果,结果表明大孔吸附树脂AB-8的效果较好。(2)对脱色后的马齿苋多糖溶液进行脱蛋白试验研究,比较了三氯乙酸法、sevag法、三氯乙酸-正丁醇法三种方法脱蛋白的效果,结果表明三氯乙酸法效果最好。(3)采用DEAE-52纤维素,对脱色脱蛋白后的马齿苋多糖进行纯化,得到POPS0、POPS1、POPS2、POPS3和POPS4五个多糖组分,纯度分别为84.31%、92.14%、90.45%、88.47%和82.16%,高效液相色谱法(HPLC)测得其分子量分别为1.801×104D、5.583×104D、2.721×105D、6.006×105D和9.443×105D。用气相色谱法测定多糖的单糖组成,结果表明:多糖POPS0中含有单糖葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为1.76:1;多糖POPS1中含有鼠李糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为1.61:1.12:1.4;多糖POPS2中含有阿拉伯糖、木糖、甘露糖和半乳糖,其摩尔比为1.34:1.84:1.52:0.15;多糖POPS3中含有木糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为1.62:1.22:1.48;多糖POPS4中含有阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为1.22:0.67:0.41。3、研究马齿苋粗多糖(POP)的体内免疫活性。结果表明:马齿苋未脱蛋白粗多糖(POP-1)在剂量100 mg/kg下,能明显增强免疫抑制小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬功能(p<0.01);在300mg/kg下,能显著提高免疫抑制小鼠的血清溶血素水平(p<0.001);在100mg/kg、300mg/kg下,能增加免疫抑制小鼠的脾脏指数(P<0.05)。马齿苋脱蛋白粗多糖POP-2在剂量300mg/kg下,能增强免疫抑制小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬功能(p<0.05);在300mg/kg下,能显著提高免疫抑制小鼠的血清溶血素水平(p<0.001);在100mg/kg、300mg/kg下,能明显增加免疫抑制小鼠的胸腺指数和脾脏指数(P<0.01或p<0.001)。4、采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)测定马齿苋粗多糖POP和纯化后多糖组分POPS1、POPS2、POPS3、POPS4对人胃癌肿瘤细胞株SGC、人(?)癌肿瘤细胞株AGS和血癌肿瘤细胞株U937的生长抑制率。结果表明,各多糖对肿瘤细胞都有一定的抑制作用。POPS1对SGC的抑制作用最强,浓度为160μg/mL时,抑制率为49.27%;POPS2对AGS的抑制作用最好,浓度为320μg/mL时,抑制率为26.33%;POPS3对U937的抑制效果最明显,浓度为640μg/mL时,抑制率为66.74%。5、采用水杨酸法和DPPH法研究马齿苋多糖的体外抗氧化活性。结果显示粗多糖以及纯化后多糖都有抗氧化活性。马齿苋多糖POPS2对羟自由基以及DPPH自由基的清除作用最好,当浓度达到960μg/mL时对羟自由基的清除率达到92.15%,对DPPH自由基的清除率为80.52%。