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鸡传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒引起的高度接触性急性呼吸道传染病。雏鸡感染会导致发育迟缓,甚至死亡。成年鸡感染一般不会死亡,但会引起母鸡产蛋量下降,鸡蛋的质量下降,对养禽业造成巨大的经济损失。疫苗免疫是防控鸡传染性支气管炎的关键。传染性支气管炎活疫苗耐热性差,目前市场上的鸡传染性支气管炎病毒活疫苗主要在-15~-20℃下保存,在运输过程中必须依靠“冷链”系统,成本高且不便于偏远地区的运输、使用。本试验通过配制的耐热保护剂与病毒液混合,并经过真空冷冻干燥技术和真空泡沫干燥技术制备出能够耐高温的鸡传染性支气管炎病毒活疫苗。通过耐热保护剂的筛选、干燥工艺的优化、样品残余水分的测定、37℃10天耐老化试验以及保存期试验等筛选出能够耐受高温的鸡传染性支气管炎病毒活疫苗。以期解决鸡传染性支气管炎活疫苗室温保存不稳定的难题,为活疫苗室温保存的研究奠定基础。1、鸡传染性支气管炎活疫苗真空冷冻干燥剂型的研究为了提高鸡传染性支气管炎病毒活疫苗的耐热性能,首先进行冷冻干燥耐热保护剂的筛选,配方中的主要成分有蔗糖、明胶、EDTA等,通过单因素变量试验,以制备出的疫苗的外观形态、干燥疫苗残余水分含量以及37℃耐老化试验筛选出合格的耐热保护剂配方。配方确定后又对真空冷冻干燥工艺进行调整,以期制备出圆饼状、表面平整无萎缩、底部无分层的鸡传染性支气管炎病毒活疫苗,鸡传染性支气管炎病毒活疫苗的残水含量在2~3%之间,37℃ 10d耐老化试验病毒滴度损失在1.OLg以内。本次试验筛选出S3-T4、S3-T9耐热保护剂配方,37℃耐老化试验病毒滴度损失分别为 0.74Lg、0.67Lg。2鸡传染性支气管炎活疫苗泡沫干燥剂型的研究泡沫干燥保护剂的主要成分有海藻糖、明胶、EDTA等,通过单因素变量试验对耐热保护剂的各个成分及比例进行筛选,以此获得能够增强鸡传染性支气管炎病毒活疫苗稳定性的耐热配方。以制备出的疫苗的外观形态、干燥疫苗残余水分含量以及37 ℃耐老化试验筛选出合格的耐热保护剂配方,再通过保存期试验筛选出最优的耐热保护剂配方。基于国内外文献及试验室已有的泡沫干燥程序进行调整,筛选出适合鸡传染性支气管炎病毒的干燥程序,以期最终制备的疫苗泡沫高度在1/2~3/4之间、泡沫均匀、残余水分含量不超过4%、在室温能够较长时间保存。本次试验筛选出P3、P3-11、P3-13、P3-15这4个比较稳定的耐热保护剂配方,对疫苗的残余水分测定结果为2.5%、2.6%、2.8%、2.2%,室温保存4个月后病毒滴度分别损失了 0.79Lg、0.85Lg、0.89Lg、0.59Lg。