确定AML微小残留病流式细胞术检测的异常免疫表型

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目的:应用有限的荧光抗体组合来确定可以用来检测急性髓性白血病微小残留病的异常免疫表型,并了解影响异常免疫表型的各种因素。 方法:应用6个抗体组合(CD15/CD33/CD34,CD15/CD117/CD34,CD7/CD33/CD34,CD7/CD13/CD19,CD2/CD14/CD33,HLA-DR/CD33/CD34)分别检测31例初诊AML骨髓和10例正常对照骨髓,用不固定多重设门的方法得到在AML出现的免疫表型及其表达率以及相应表型在正常对照骨髓的表达率。应用免疫表型表达对数差值(Log dif.[A/N])量化AML免疫表型在AML骨髓与正常对照骨髓的差异,以Log dif.[A/N]≥2确定为异常免疫表型。观察这些异常免疫表型在AML的出现频率、免疫表型表达率和免疫表型代表率。对2例AML患者治疗前后的异常免疫表型进行了追踪。 结果:明确了log dif.[A/N]值在确定异常免疫表型的重要作用及其影响因素;明确了log dif.[A/N]≥2.0作为确定异常免疫表型的界限;异常免疫表型表达率为42.20%±9.36%而非异常免疫表型表达率为49.50%±11.40%(Mann-Whitn ey U=35,p=0.126)。免疫表型代表率在13种异常免疫表型为52.10%±11.50%,而9种非异常免疫表型为63.80%±8.50%(Mann-Whitney U=19,p=0.007)。在AML检测到22种免疫表型,得到13种异常免疫表型。在31例AML检测到至少1种异常免疫表型者25例(80.6%),4种及以上异常免疫表型者20例(64.5%)。2例AML患者均能用本研究的方法清楚地显示治疗后的白血病细胞下降情况。 结论:1.得到22种免疫表型,其中确定了13个异常免疫表型。2.Log dif.[A/N]值对确定异常免疫表型具有最重要的意义;影响log dif.[A/N]值的主要因素是急性髓性白血病免疫表型在正常对照骨髓细胞的表达率;Log[A/N]≥2.0作为确定异常免疫表型的界限是合适的;log dif.[A/N]值计算公式可以演变为计算化疗后某一异常免疫表型阳性白血病细胞下降程度的对数值,即log dif.[化疗前后]值。3.在31例AML患者中有25例(80.6%)至少检测到1种异常免疫表型,检出4种及以上异常免疫表型者达20例(64.5%)。提示本研究的方法检测AML-MRD可能比分子生物学方法适用于更多的AML患者,但其敏感度为AML细胞下降达2.5个对数级时仍能检出。
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