邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯降解菌的分离鉴定及降解特性研究

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邻苯二甲酸酯类化合物(phthalic acid esters,PAEs,又名酞酸酯)是一类人工合成、用途广泛的有机化合物。主要用在塑料增塑剂、油漆、涂料等领域。使用最广泛的PAEs是邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP),它极易转移到环境中。研究表明,DEHP有类雌激素效应,有致癌、致畸、致突变的作用。已被列为“优先控制污染物”。生物降解是降解DEHP的主要途径。本研究旨在从受污染的环境中分离出降解DEHP的菌株,并对其相关性质进行研究,力求能为修复受DEHP污染的环境提供理论参考和菌源。(1)采用梯度压力驯化法从山东菏泽被石油污染的土壤中分离出一株DEHP降解菌,命名为YC-RL4。通过革兰氏染色、电镜观察、Biolog鉴定确定其为汇合分支杆菌(Mycobacterium confluentis),革兰氏阳性。(2)通过单因素实验获得了菌株YC-RL4降解DEHP的最佳条件:降解最佳p H为9,生长最佳p H为8;降解最佳温度为20℃,生长最佳温度为30℃;该菌株降解DEHP和生长的最佳Na Cl浓度为3%,能耐受的最高Na Cl浓度为7%。该菌株耐受DEHP的最大浓度在700-800mg/L之间。(3)底物谱实验证明菌株YC-RL4能降解多种DEHP类似物,说明其具有较宽的底物范围以及较强的环境适应能力。(4)在发酵罐模拟实验中菌株YC-RL4能够利用DEHP为唯一碳源生长,并且在反应过程中产生了酸性代谢产物,这为该菌株将来的工业化应用提供了依据。(5)通过实验获得了菌株YC-RL4对不同初始浓度的DEHP在不同时间的降解量,确定降解反应符合一级动力学模型。(6)用质谱检测了菌株YC-RL4在不同时间点降解DEHP的代谢产物,推测了代谢途径,为降解机理的深入研究提供了理论参考。
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