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随着西葫芦保护地栽培面积的不断扩大,选育耐冷性较强的品种成为当前西葫芦育种的新重点。花粉是决定遗传特性的物质之一,其低温下的萌发特性对耐冷品种的选育有重要的实践意义。本试验主要研究西葫芦花粉在不同开花温度和萌发温度下的萌发力来区分不同的自交系(品种),并和鉴定西葫芦耐冷性的其它指标进行相关分析,以期寻找用花粉在低温下的萌发力来鉴定西葫芦不同自交系(品种)的耐冷性的温度指标,进一步为西葫芦耐冷自交系的筛选和杂交亲本选配提供依据。1用液体培养基法,在不同开花温度(flowering temperature,FT)和萌发温度(germination temperature,GT)组合的处理下,测定了西葫芦14个自交系的花粉萌发率,结果表明:①随FT和GT的降低,西葫芦花粉萌发力下降。正常GT24℃下平均花粉萌发率在48%以上, GT15℃下为31%左右, GT12℃下为18%左右,GT9℃下萌发率极低,接近零. FT和GT的影响都达到了极显著,但GT影响较大,FT和GT的交互作用不显著。②不同的FT和GT组合下,自交系间花粉的萌发率除FT15℃/GT24℃下差异不显著,其它FT(15℃、12℃、9℃)和GT(24℃、18℃、15℃、12℃、9℃)的各组合温度下,都达到了极显著差异。③在FT9℃/GT12℃培养时,自交系间方差分析的F值最大,且变异系数最大,花粉萌发力的差异达到最大,且与田间的耐冷性基本一致,说明FT9℃/GT12℃可作为鉴定西葫芦不同自交系(品种)耐冷性的适宜温度指标。耐冷的萌发率在25%以上,耐冷中等的在10-25%,不耐冷的小于10%。2用TTC法,在不同开花温度(flowering temperature,FT)和染色温度(coloration temperature,CT)组合的处理下,测定了14个自交系的花粉染色率,结果表明:①染色适宜的TTC浓度为1.0%。在24℃、18℃、15℃、12℃和9℃下的适宜染色时间分别是40min、50min、60min、90min和大于90min。②随FT和GT的降低,西葫芦花粉染色力下降。正常GT24℃下平均花粉染色率在49%以上, CT15℃下为30%左右,CT12℃下为18%左右,CT9℃下染色率极低,接近零,FT和CT的影响都达到了极显著,但CT影响较大,FT和CT的交互作用不显著。在低温组合下,自交系间花粉的萌发率都达到了极显著差异。③在FT9℃/CT12℃培养时,自交系间方差分析的F值最大,且变异系数最大,花粉染色力的差异达到最大,说明该温度组合可以作为鉴定西葫芦不同自交系(品种)染色力差异的适宜花粉培养温度。但与品种耐冷的相关性不稳定,没有花粉液体培养基法鉴定品种的耐冷性好。3用14个自交系幼苗(三叶一心)在光照培养箱内低温5℃下处理,随低温处理时间延长,冷害指数差异增大,到7d时达到最大,之后又减小。处理7d时,冷害较轻的有Selm、Sz,较耐冷,中等的F-2、31-6、S17、S25、23-4G、Q-1、31-10、15-1,较重的有20-3、23-1G、F-1、14-9,不耐冷,与田间鉴定的结果基本一致。可见处理7d的冷害指数是鉴定西葫芦各自交系(品种)耐冷性差异的适宜指标。但耗时太长,约13d。4用14个自交系种子在24℃、18℃、15℃、13℃下进行种子发芽试验,结果表明:方差分析各自交系间发芽率和发芽指数常温24℃下差异都不显著,随温度由18℃向13℃下降,差异都达到了显著或极显著,在13℃达到了最大,13℃可以区别西葫芦不同自交系(品种)间种子低温下的发芽力。但低温13℃下发芽指数的F值、变异系数和自交系耐冷相关系数的绝对值,都分别大于发芽率的对应值,多重比较13℃下的发芽指数比发芽率更能突显不同自交系间的差异,且和田间的耐冷性基本一致,所以用13℃下种子的发芽指数鉴定西葫芦的耐冷性较好。但与西葫芦耐冷的相关度低于花粉液体培养基法,且耗时太长,约16d。5在相关性分析中发现,用液体培养基法测定的花粉低温下萌发力与冷害指数法鉴定耐冷性的相关度达到了极显著,在FT9℃/GT12℃达到最大;与种子低温发芽指数法鉴定耐冷性的相关度,在各低温下也达到了极显著或显著,在FT9℃/GT12℃达到最大。所以低温FT9℃/GT12℃是鉴定西葫芦不同自交系(品种)间的耐冷性,培养西葫芦花粉的适宜温度指标,具有较高的可靠性。用TTC法也可在FT9℃/GT12℃下鉴定西葫芦的耐冷性,但不大稳定。另外,花粉鉴定的耐冷性是成株座果期的耐冷性,比种子发芽指数法和幼苗冷害指数法鉴定的前期的耐冷性更符合耐冷育种的需要,且花粉液体培养基法耗费更少,时间只需1d(而另两者需13-16d),且结果更稳定;所以用花粉液体培养基法鉴定西葫芦不同自交系(品种)的耐冷性比其它方法相对较好。6用6个耐冷级别不同的自交系双列杂交(GriffingⅣ),对15个杂交组合进行耐冷配合力分析和超标优势分析,结果表明:①超标优势分析,在FT9℃/GT12℃和FT12℃/GT12℃下有超标优势的组合依次为SZ×Sel-M、SZ×31-6、Sel-M×31-6、Sel-M×14-9、SZ×S25、SZ×14-9其中耐冷的亲本Sz、Sel-M的耐冷组合优势最大;②配合力方差分析,在FT9℃/ GT12℃和FT12℃/GT12℃下一般配合力都达到了极显著,特殊配合力达到了显著或极显著。说明西葫芦加性基因效应与非加性基因效应对西葫芦耐冷性都有很大作用,加性效应更大些。③杂交组合Sz×Sel-M、S25×14-9、31-6×20-3的特殊配合力在FT12℃/GT12℃和FT9℃/GT12℃下都很高,但亲本31-6、20-3、14-9的一般配合力为负向效应,组合S25×14-9、31-6×20-3并不适于耐冷优势亲本配组,而组合Sz×Sel-M不但特殊配合力高,且亲本Sz和Sel-M的一般配合力高,是进行耐冷育种的较优选配。所以西葫芦耐冷亲本的选配应从总配合力来考虑,只有在选择一般配力高的亲本的基础上,再选择特殊配合力高的组合,才能获得较优的组合。