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目的 以RCS大鼠为动物模型观察遗传性视网膜色素变性过程中视网膜感光细胞凋亡对视皮质17区细胞的影响及其机制。观察抗凋亡剂金纳多(EGb761)对视网膜色素变性的RCS大鼠的作用,探讨其对视网膜变性神经元保护的可能机制。 方法 取出生后9、15、20、25、30、35、40、60天大的RCS大鼠和同龄SD大鼠的视皮质,采用尼氏(Nissl)染色法观察RCS大鼠视皮质17区神经元的形态改变,并用免疫组化方法检测FasL和bcl-2蛋白的表达情况。把出生后雄性RCS大鼠48只随机分为给药组和对照组。RCS大鼠给药组从生后5天开始腹腔注射EGb761,每3天注射一次,剂量为100mg/kg。RCS大鼠对照组注射生理盐水,剂量同上。HE染色和TUNEL检测观察EGb761对视网膜色素变性神经元的保护作用。应用免疫组织化学方法检测FasL和bcl-2蛋白的表达情况。 结果 (1)Nissl染色显示RCS大鼠随着出生时间的不同,其视皮质17区神经元的截面积比SD大鼠的神经元截面积小,在生后20、25、30、35天组差别有统计学意义(P<0.05)。RCS大鼠视皮质17区细胞数目随生后时间的不同神经元数目递减的趋势比SD大鼠小,细胞数目比SD大鼠多,在生后30、35天组差别有统计学意义(P<0.05),其余各组间差别无统计学意义。 (2)FasL免疫组化染色显示RCS大鼠视皮质17区在生后25、30、35、40天组与同龄SD大鼠相比阳性神经元数目、光密度值均增高(P<0.05),其余时间段差别无统计学意义。bcl-2免疫组化染色显示在生后30、35、40天组与同龄SD大鼠相比阳性神经元数目、光密度值均增高(P<0.05)。 (3)HE染色显示RCS大鼠EGb761组20、25天时,视网膜内核层厚度均超过生理盐水组(P<0.01),内核层细胞数目和节细胞层细胞数目多于生理盐水组,且排列较规整,感光细胞数目比对照组细胞数目多(P<0.05)。30天以后各时间段EGb761组和对照组感光细胞数目相比无明显差异。 (4)EGb761组大鼠视网膜FasL表达规律与生理盐水组相似,但15、20、25天组FasL表达较生理盐水组减少(P<0.05)。bcl-2染色显示生后20天的EGb761组和生理盐水组在节细胞层和内核层可观察到阳性染色。RCS大鼠EGb761组和对照组bcl-2阳性染色无明显差别。TUNEL染色显示RCS大鼠EGb761组20、25天,外核层也可观察到TUNEL反应阳性的细胞核,阳性细胞数与对照组相比,差异有统