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目的：卵巢癌是妇科死亡率最高的恶性肿瘤之一，五年生存率仅30％左右，传统方法治疗效果较差，因此有必要寻找新的治疗方法。基因治疗是一种较有前景的治疗方法，新基因的发现常常能够促进我们对肿瘤发生发展的认识，并有可能发展成为肿瘤治疗的新方法。PNAS-4是我们实验室发现的一个新基因，它广泛存在于动物和植物体中，初步实验证明其可诱导癌细胞凋亡，抑制肿瘤生长。但是对该基因功能的研究目前还较少，对卵巢癌的作用研究尚未进行。为此该课题设计观察新基因h-PNAS-4对卵巢癌是否有抗肿瘤作用，是否能成为卵巢癌治疗的新方法。方法：用脂质体转染法，将与靶载体连接好的产物h-PNAS-4-PcDNA3．1转染人卵巢癌上皮细胞SKOV3。用RT-PCR检测h-PNAS-4在转染后卵巢癌细胞中的过表达；用MTT法检测卵巢癌细胞增殖抑制情况；用琼脂糖凝胶电泳（DNA-Ladder）检测细胞凋亡；用Hoechst33528染色观察凋亡细胞形态；用流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率和细胞周期；用SKOV3建立卵巢癌裸鼠动物模型。每周两次，50μg质粒／只，裸鼠尾静脉注射给药，共治疗十一次。用游标卡尺测量并记录裸鼠肿瘤最长径和最短径，计算肿瘤体积并绘制肿瘤体积一时间曲线。用HE染色观察肿瘤组织性状；用免疫组化检测血管上皮特异性标记CD31的表达并计算组织内微血管密度（MVD），用Tunel染色检测肿瘤组织原位凋亡；同时观察裸鼠一般状态以及对心、肝、脾、肺、肾的毒副作用的形态学进行观察。结果：RT-PCR检测h-PNAS-4在用脂质体转染法转染前后的SKOV3细胞中的表达，结果显示在转染前后均有表达，且转染后细胞中检测到基因的过表达；MTT法结果显示h-PNAS-4-PcDNA3．1对卵巢癌细胞SKOV3有增殖抑制作用，且该作用具有时间依赖性。48小时统计学差异最明显，h-PNAS-4-PcDNA3．1组SKOV3相对凋亡率约50.1082％；脂质体组：19.6951％；PcDNA3.1空载+脂质体组：25.0541％；琼脂糖凝胶电泳（DAN-Ladder）显示经脂质体转染后h-PNAS-4-PcDNA3．1组检测出细胞凋亡的典型梯状分布条带，提示该基因可诱导细胞凋亡；Hoechst33258染色显示经脂质体转染后，h-PNAS-4-PcDNA3．1组的细胞核及细胞质内见浓染致密的颗粒状荧光块，此为细胞凋亡典型形态；流式细胞分析显示，h-PNAS-4-PcDNA3．1组凋亡率增加，转染后48小时，细胞凋亡率为82.6％，而其余各组凋亡率分别为：A、阴性对照组：17.7％；B、脂质体组：33.1％；C、PcDNA3．1空载+脂质体组：40.0％；周期分析结果显示主要抑制S期细胞；动物实验结果显示：h-PNAS-4有抑制肿瘤生长作用。基因h-PNAS-4治疗组裸鼠肿瘤体积较对照组体积明显缩小；此外h-PNAS-4可延长卵巢癌荷瘤裸鼠生存期。接种后第113天，生理盐水阴性对照组五只裸鼠全部死亡，死亡率100％；脂质体组死亡三只，一只用于石蜡切片，死亡率75％；PcDNA3．1空载+脂质体组裸鼠死亡两只，一只用于石蜡切片，死亡率50％：h-PNAS-4-PcDNA3．1组裸鼠除有一只死亡，一只用于石蜡切片，其余均未死亡，死亡率25％。肿瘤组织HE染色示治疗组肿瘤中心明显坏死，细胞数量减少，细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，提示肿瘤细胞凋亡。重要器官无明显损害；Tunel检测到其凋亡增加；免疫组化示h-PNAS-4-PcDNA3．1组的CD31表达降低明显，MVD低于对照组。副反应观察未发现明显毒副作用。与对照组比较h-PNAS-4-PcDNA3．1组裸鼠一般状态良好，尾静脉注射后，治疗组裸鼠较活跃，食欲有所增加；尾部出现局部皮肤脱落，断尾，提示h-PNAS-4对尾部有局部刺激作用；心、肝、脾、肺、肾各器官HE染色未见明显坏死，提示无明显毒副作用。差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：1、h-PNAS-4-PcDNA3．1基因经脂质体转染后，在SKOV3细胞中高表达。2、h-PNAS-4-PcDNA3．1基因在体外可抑制细胞生长增殖，诱导细胞凋亡。3、h-PNAS-4-PcDNA3．1基因能够抑制肿瘤生长，延长生存期，有较强的抗卵巢癌肿瘤作用。4、h-PNAS-4基因无明显的毒副作用。5、h-PNAS-4有可能成为卵巢癌治疗的新方法。