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糖尿病是一种严重威胁着人类健康的慢性非传染性疾病,它具有两种类型,I 型糖尿病(type 1 diabetes mellitus,T1DM)和Ⅱ型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)。2型糖尿病通常由人们不良的饮食习惯和生活方式等所导致,患者表现出对胰岛素敏感性降低,血液中葡萄糖含量过高,并导致多种并发症,如白内障,心脑血管疾病,肾脏疾病等,这些疾病严重影响患者的正常生活以及生活质量。因此寻找科学有效的治疗糖尿病的方法至关重要。G蛋白偶联受体120(GPR120),也称为游离脂肪酸受体4(FFA4),是一种不饱和脂肪酸受体,它属于G蛋白偶联受体超家族中的视紫红质样受体家族。GPR120在调节胰岛素的分泌有重要作用,被认为是糖尿病治疗的潜在药物靶点。已有研究显示GPR120激活后可以调节胃肠肽分泌,味觉偏好和葡萄糖稳态等,从而调节能量代谢和触发抗炎效果。在原代脂肪细胞和3T3-L1脂肪细胞系中,GPR120被活化促进葡萄糖转运蛋白GLUT4向质膜转位,从而导致葡萄糖转运增加。2010年美国加利福尼亚大学Da Young Oh构建了 GPR120缺陷型小鼠模型,缺陷型小鼠表现出对高脂饮食更敏感,导致葡萄糖耐受不良,胰岛素抵抗,脂肪肝和脂肪细胞分化减少。胰岛素是人体内平衡血糖的重要激素,由胰岛β细胞分泌,它的分泌对于血糖平稳起着不可替代的作用。但是胰岛细胞是由多种细胞组成,包括产生胰岛素的β细胞,释放胰高血糖素的α细胞,分泌生长抑素的δ细胞,释放饥饿激素的ε细胞和产生胰多肽的PP细胞。众多的研究表明,在胰岛β细胞的GPR120被激活后,将会促进胰岛素分泌。最近有文章报道,在胰岛中GPR120被激活后,会抑制胰岛δ细胞生长抑素的分泌。这些研究结果表明GPR120在胰岛δ细胞中同样具有重要作用,可能是胰岛环路调控的重要分子。但是GPR120在胰岛δ细胞中的具体作用及其机制尚未明确,亟待解决。因此本文主要研究在胰岛δ细胞中,GPR120对生长抑素合成及分泌的调控作用及其机制。研究目的:探究在胰岛δ细胞中,GPR120对生长抑素合成及分泌的调控作用及其机制。研究方法:1.在各种组织与细胞中,通过RT-PCR和q-RT-PCR检测GPR120在mRNA水平的表达量。2.胰岛δ细胞给高糖/高糖+GPR120激动剂孵育后,使用ELISA检测生长抑素分泌水平的变化。3.在高糖状态下,胰岛δ细胞给GPR120激动剂/不给GPR120激动剂后,通过RT-PCR和q-RT-PCR检测不同时间点生长抑素合成水平的变化。4.胰岛δ细胞给PKC阻断剂/L型钙离子通道/R型钙离子通道阻断剂孵育后,使用ELISA检测生长抑素分泌水平的变化。5.通过WESTERN BLOT检测胰岛δ细胞中β-arrestin1/β-arrestin2的干扰效率,将β-arrestin1/β-arrestin2干扰的胰岛δ细胞给高糖/高糖+GPR120的激动剂孵育后,通过ELISA检测生长抑素分泌水平的变化。6.在HEK293细胞中,通过BRET检测GPR120对β-arrestin1的招募能力。7.在HEK293细胞系和TGP52细胞系中,通过Confocal检测GPR120与β-arrestin1的共定位情况。8.在各种组织与细胞中,通过RT-PCR和q-RT-PCR检测G蛋白偶联受体激酶家族(GRK1-7)在mRNA水平的表达量。9.在胰岛δ细胞系中GRK被抑制后,通过Confocal检测GPR120与β-arrestin1的共定位情况。研究结果:1.GPR120和GRK1-7在多种组织与细胞中广泛表达。其中GPR120在胰岛δ细胞中有高表达。2.高糖能促进胰岛δ细胞分泌生长抑素,当胰岛δ细胞孵育GPR120激动剂GW9508后,胰岛δ细胞分泌生长抑素受到抑制。然而胰岛δ细胞系中干扰掉β-arrestin1后再孵育GW9508,解除了对生长抑素分泌的抑制效果。3.胰岛δ细胞在高糖状态下培养并孵育不同时间点GPR120激动剂,生长抑素合成受到抑制。4.在 HEK293 细胞/TGP52 细胞中共转染 GPR120-YFP 和β-arrestin1-RFP 质粒,观察到两者有共定位。5.TGP52 细胞中 GRK5 的表达受到抑制,GPR120-YFP 和β-arrestin1-RFP的共定位情况产生影响。研究结论:胰岛δ细胞中的GPR120激活可以抑制由高糖引起的生长抑素合成及分泌,而该过程由GRK5/β-arrestin1信号通路调控。