新疆喀什地区维吾尔族母乳中Bifidobacteria的分离筛选及其益生特性

来源 :石河子大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zhuzhenxing1
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目的:通过对新疆喀什地区维吾尔族妇女母乳中的双歧杆菌进行分离筛选及鉴定,确定了可培养双歧杆菌的多样性和系统发育关系,从中筛选出一些高活性的益生双歧杆菌菌株,以期为开发针对少数民族群体、调节肠道菌群、促进健康的营养食品,为明确少数民族的饮食结构对胃肠道菌群的影响机制以及对健康的相关影响奠定一定的理论基础。方法:本实验采用改良的MRS、BS培养基对新疆喀什地区的维吾尔族母乳进行乳酸菌分离,通过属间特异性PCR以及16S r RNA基因序列确定乳酸菌的种属分类及其亲缘关系,再利用(GTG)5-PCR、BOX-PCR和ERIC-PCR三种指纹图谱技术对16S r RNA基因高度同源性的双歧杆菌菌株进一步鉴定至种水平。最后,通过牛津杯法筛选出能够抑制致病菌的双歧杆菌菌株,并进行耐酸耐胆盐的益生实验。结论:1.从新疆喀什地区维吾尔族母乳样品中分离到可培养菌株共1784株,通过16S r RNA基因序列表明新疆喀什地区维吾尔族母乳中的乳酸菌属主要分为Lactobacillus、Bifidobacterium、Lactococcus、Enterococcus、Streptococcus 5个属,其中Bifidobacterium共有15株。2.利用(GTG)5、BOXA1R和ERIC1R/ERIC2三种不同引物,对15株已扩增成功的双歧杆菌以及8株模式菌株进行Rep-PCR,通过对三种指纹图谱的分析对比,15株双歧杆菌属于三个种,其中包含两个亚种。分别为:8株假小链双歧杆菌,2株长双歧长亚种,3株长双歧婴儿亚种,2株短双歧杆菌。3.采用牛津杯法,筛选出能够抑制6种致病菌的双歧杆菌,其中4株假小链双歧杆菌能够对这六种致病菌均产生抑制效果。通过耐酸耐胆盐实验,则Bifidobacterium pseudocatenulatum 92菌株不仅能够对6种致病菌产生抑制性,而且还能够在p H为3.0的条件下生长,当胆盐浓度为1.0%时,也能够检测到该菌株的生长。
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