8-硝基白杨素增强顺铂抑制卵巢癌HO-8910细胞增殖及诱导凋亡的效应

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目的:研究8-硝基白杨素(NOC)增强常规化疗药物顺氯氨铂(DDP)抑制人卵巢癌HO-8910增殖及诱导细胞凋亡作用,并探讨其作用机制是否与细胞P38MAPK、P-P38MAPK蛋白的表达增强、谷胱甘肽(GSH)的耗竭和Caspase-3活化有关,为将NOC作为临床卵巢癌化疗增敏剂的开发和利用提供实验和理论依据。方法:以体外培养的人卵巢癌细胞HO-8910为研究对象,不同剂量的顺铂和8-硝基白杨素干预卵巢癌HO-8910细胞后,利用MTT法检测细胞增殖情况;AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率,Western-Blot检测P38MAPK,P-P38MAPK蛋白水平的表达;分光光度法分别检测GSH含量的变化以及Caspase-3活性的变化;结果:MTT法检测结果显示:与对照组相比,各剂量的DDP、NOC对HO-8910细胞的生长均有抑制作用,并呈明显的剂量依赖性和时间依赖性;且2u mol/LDDP+20μmol/L NOC联合给药组细胞生长抑制率71.8%与单用20μmol/L DDP处理组的细胞生长抑制率72.4%相当(P>0.05),说明NOC与DDP联合应用,产生了相当于10倍剂量DDP对HO-8910细胞的增殖抑制效果AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术检测结果显示:NOC和DDP作用HO-8910细胞48小时后,2μmol/L DDP+20μmol/L NOC联合给药组细胞凋亡率43.5%,几乎达到20μ mol/L DDP单独用药组细胞凋亡率47.7%(P>0.05)。Western结果显示:与对照组相比,各用药组P38MAPK、P-P38MAPK的表达均表现不同程度地增强(P<0.05),且NOC和DDP的联合用药组的表达与DDP单独用药组相当(P>0.05):分光光度法检测结果显示,与对照组相比,各用药组的GSH含量不同程度降低(P<0.01);Caspase-3检测结果显示,与对照组相比,各用药组Caspase-3的活性表现不同程度增高(P<0.01)。结论:1.8-硝基白杨素能增强顺铂对人卵巢癌HO-8910细胞的生长增殖抑制作用。2.8-硝基白杨素能促进顺铂诱导HO-8910细胞的凋亡。3.8-硝基白杨素的化疗增敏作用可能与细胞内GSH的耗竭,Caspase-3活性增加,促进P38MAPK、P-P38MAPK蛋白表达有关。
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