使用差速离心、蔗糖垫和蔗糖密度梯度离心法，从人工感染白斑综合症病毒(White spot syndrome virus，WSSV)的克氏原螯虾中提取WSSV，Bradford法测定病毒浓度为0.912mg／ml。分别取1ml的病毒悬液，用两种离子型表面活性剂SDS(十二烷基硫酸钠)和脱氧胆酸钠，及两种非离子型表面活性剂Triton X-100和Tween-20室温处理30min后，经不连续蔗糖梯度(40％—52％)离心和SDS-PAGE显示，确定这四种表面活性剂都可以增溶病毒囊膜的蛋白VP28。当病毒浓度为0.912mg／ml时，SDS、脱氧胆酸钠、Triton X-100和Tween-20增溶WSSV囊膜蛋白VP28的最佳浓度(v／v)分别为0.5％、1％、1％、1.5％。 地高辛(DIG,Digoxigenin-3-0-methylcarbonyl-e-aminocaproic acid-N-hydro xysuccinimide ester)标记完整的病毒粒子，标记产量为300pg／μl。标记的病毒用2％(v／v)非离子表面活性剂Tween-20增溶后，经阳离子交换层析(CM-sep harose)纯化，得到了电泳纯的病毒囊膜蛋白VP28。纯化的VP28与对虾鳃细胞膜的结合实验表明，VP28不能与对虾鳃细胞膜结合，即纯化的VP28不具有结合活性。 以健康对虾的鳃组织为材料，经过差速离心后获得对虾鳃细胞膜。测定蛋白浓度后，用地高辛进行标记，并测得标记后的产量为300pg／μL；SDS-PAGE得出对虾鳃细胞膜的多肽图谱；并与对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus，WSSV)进行体外结合实验，确定标记后的对虾鳃细胞膜具有结合活性。 对虾鳃细胞膜经过不同温度、pH、表面活性剂、无机盐离子浓度、DTT(二硫苏糖醇)、有机溶剂，及超声波处理后，再与WSSV结合。结果显示：对虾鳃细胞膜在25℃—45℃之间结合活性没有明显下降，但经煮沸5min后，结合活性丧失；pH的变化可以改变对虾鳃细胞膜的结合活性，其中在pH5和pH8时，活性比其它的pH值要高；NaCl不会使对虾鳃细胞膜的结合活性丧失，但NaCl浓度在1.5M和2.0M时可使其结合活性明显下降；硫酸铵在浓度为1M时对虾白斑综合症病毒仪SSV)囊膜蛋白vp28与对虾鳃细胞膜蛋白的分离和结合活性分析对虾鳃细胞膜的结合活性最高，在低于或高于IM时都会对虾鳃细胞膜的结合活性受到影响;超声波对虾鳃细胞膜的活性影响较大，作用时间505就可使对虾鳃细胞膜的活性丧失。共选用了5种表面活性剂处理对虾鳃细胞膜，包括Tween-Zo、NP并。、TritonX一00、脱氧胆酸钠、sDS(十二烷基磺酸钠)，作用浓度均为2%。前4种表面活性剂对结合活性有影响但不能使结合活性完全丧失，而SDS可使对虾鳃细胞膜的活性丧失。在上述各种表面活性剂中加入了0.IM二硫苏糖醇，实验结果区别很小，证实二硫苏糖醇对对虾鳃细胞膜的结合活性既没有起到保护的作用也没有起到破坏的作用。随着蔗糖浓度的加大，对虾鳃细胞膜的结合活性也随着下降，但是当蔗糖浓度达到62%时，对虾鳃细胞膜的结合活性仍然没有完全丧失。在有机溶剂中，三氯乙酸可使对虾鳃细胞膜的结合活性丧失，乙醇、丙酮可使对虾鳃细胞膜的结合活性有所下降，但不能完全丧失。 经2%Tween一20处理的对虾鳃细胞膜，CM一sephar0Se FF离子交换层析，得到3个洗脱峰;合并浓缩后测定与WSSV的结合活性，并将活性组分进行SDS一PAGE得到其蛋白多肤图谱。2%Tween一20处理后的对虾鳃细胞膜经过S叩hadexG一75凝胶过滤层析，浓缩后测定与wssv的结合活性，将得到的活性与蛋白量之比的最高峰进行SDS一队GE得到其蛋白多肚图谱。将离子交换的活性组分多肤图谱与凝胶过滤的活性组分多肤图谱相比较，得出分子量约为53KD的对虾鳃细胞膜蛋白具有与WSSV结合的活性。 将对虾鳃细胞膜与不同浓度的肝素钠混合，室温放置3h，发现对虾鳃细胞膜不再具有与WSSV结合的能力。将病毒与不同浓度的肝素钠混合放置同样的时间，却并未使病毒丧失与对虾鳃细胞膜结合的能力。从而推断肝素钠能够与病毒竞争对虾鳃细胞膜上的结合位点。