【摘 要】
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结缕草是一种被广泛应用的暖季型草坪草。它有着很多优良的特征:具有适应性广,抗旱性强、扩展力强、耐磨性和耐践踏性强、弹性高等特性,被广泛用于草坪、生态恢复、水土保持
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结缕草是一种被广泛应用的暖季型草坪草。它有着很多优良的特征:具有适应性广,抗旱性强、扩展力强、耐磨性和耐践踏性强、弹性高等特性,被广泛用于草坪、生态恢复、水土保持。但是结缕草绿色期短,抗寒性不太强。如果以传统育种方法与现代生物技术相结合尤其是现代生物技术的应用,将大大缩短育种周期。所以利用基因工程进行遗传改良的研究一直备受人们关注。我们在建立了高效的结缕草组培再生体系的基础之上,通过基因枪法和农杆菌介导法转化CBF1和IPT基因,获得转化CBF1基因的植株,为培育新品种打下基础。主要结果如下: 1.以结缕草成熟胚为外植体诱导愈伤组织的最适培养基:MS+2,4-D3.0mg/L+500mg/L+VB1（4.0mg/L）,诱导率43.20%; 2.继代培养最适合的培养基为MS+2,4-D（2mg/L）+6-BA（0.2mg/L）+ABA（0.2mg/L）胚性愈伤率28.4%, 3.分化培养基为MS+KT（2.0mg/L）+1.0（mg/L）+NAA（0.1mg/L）分化率56%; 4.生根培养基为1/2MS+NAA（0.1mg/L）,生根率100%; 5.以结缕草成熟胚诱导的愈伤组织为受体,采用基因枪轰击法和农杆菌介导法转化结缕草可获得转基因植株; 6.PCR检测表明外源基因CBF1已整合到结缕草基因组DNA中; 7.RT-PCR检测表明目的基因已在结缕草转基因植株的转录水平表达; 8.农杆菌介导法基因CBF1遗传转化率分别为0.26%
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