【摘 要】
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目的:运用网络药理学的方法来预测高良姜素治疗白癜风的作用靶点,并探索其作用机制;研究高良姜素乳膏对实验性白癜风动物模型NLRP3通路的影响。方法:1.利用TCMSP数据库查询到高良姜素中的化学成分,将筛选出的高良姜素的活性成分并且搜集其靶点,通过4个数据库搜集白癜风疾病靶点。建立蛋白质之间的相互作用网络,此外,进行GO和KEGG富集分析,利用分子对接来预测相关基因。2.使用10%H2O2诱导建立C
【基金项目】
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国家自然科学地区科学基金项目（82160821）；
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目的:运用网络药理学的方法来预测高良姜素治疗白癜风的作用靶点,并探索其作用机制;研究高良姜素乳膏对实验性白癜风动物模型NLRP3通路的影响。方法:1.利用TCMSP数据库查询到高良姜素中的化学成分,将筛选出的高良姜素的活性成分并且搜集其靶点,通过4个数据库搜集白癜风疾病靶点。建立蛋白质之间的相互作用网络,此外,进行GO和KEGG富集分析,利用分子对接来预测相关基因。2.使用10%H2O2诱导建立C57 BL/6白癜风小鼠模型,待造模成功后进行给药,给予不同含高良姜素浓度的高良姜素给药干预,涂抹30天后取造模处皮肤,一部分皮肤组织采用苏木精-伊红（HE）染色法观察小鼠皮肤及含黑素毛囊状态;另一部分皮肤组织采用western blot和RT-q PCR法检测NLRP3炎症小体通路相关蛋白;采血完成后通过离心得到血清,使用酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠血清中NLRP3炎症小体通路相关指标的含量。结果:1.网络药理学研究结果表明高良姜素治疗白癜风的核心靶点有酪氨酸酶（TYR）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）、诱导性一氧化氮合酶（NOS2）、肿瘤坏死因子（TNF）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-18（IL-18）等11个。GO和KEGG富集结果显示,高良姜素治疗白癜风主要涉及到的生物过程可能在细胞增殖和凋亡中发挥作用,参与生物的基因表达、信号转导、氧化还原、蛋白水解等过程,主要作用通路有NOD样受体信号通路、酪氨酸代谢信号通路、HIF-1信号通路和NF-kappa B信号通路等。2.通过病理切片可看出正常组小鼠表皮无增生,模型组小鼠表皮有明显增生以及含黑素毛囊损伤,高良姜素乳膏各剂量组小鼠表皮增生程度和含黑素毛囊相对于模型组均有改善;ELISA实验结果表明,相比之下高剂量的高良姜素乳膏能显著减少小鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-18、ASC、caspase-1、NLRP3和CXCL16含量（P＜0.05）;western blot实验结果表明,低、高剂量的高良姜素乳膏能显著降低小鼠皮肤组织中IL-1β、IL-6、ASC、caspase-1、NLRP3、CXCL10和CXCL16蛋白的表达水平（P＜0.05）;RT-q PCR实验结果表明,低、中、高剂量的高良姜素乳膏均能显著降低小鼠皮肤组织中caspase-1、IL-1β、IL-6和CXCL10 m RNA表达水平（P＜0.05）。结论:网络药理学研究初步揭示了高良姜素对白癜风的治疗作用有多靶点、多通路的特点;高良姜素乳膏能能够抑制白癜风小鼠的表皮增生;通过抑制NLRP3炎症小体通路发挥其改善白癜风的作用。
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