目的通过体外培养原代大鼠海马神经元体系的建立,研究在原代大鼠海马神经元中Sema3F与VEGF mRNA及蛋白表达的相关性,通过与Sema3F相关的海马神经元生长锥塌陷机制研究,为与Sema3F相关的疾病提供治疗依据和方法。方法1.取新生24小时内的Wistar大鼠,在超净台内无菌条件下分离出双侧海马,进行原代大鼠海马神经元的培养工作;2.实验组:提取原代大鼠海马神经元,培养基中加入Sema3F,分别取0分钟、5分钟、15分钟、30分钟的样本。对照组:提取原代大鼠海马神经元,培养基中加入相同浓度的胎牛血清,分别取0分钟、5分钟、15分钟、30分钟的样本。3.应用Realtime-PCR和Western Blot技术分别检测实验组和对照组原代大鼠海马神经元中VEGF mRNA及其蛋白表达的含量。应用SPSS22.0统计软件进行统计学分析,所得数据采用重复测量方差分析,P﹤0.05为差异有统计学意义。结果实验组原代大鼠海马神经元中加入Sema3F后在转录和翻译水平可见VEGF mRNA及蛋白表达的下降,而对照组原代大鼠海马神经元中VEGF mRNA及其蛋白表达无明显变化。结论1.成功建立体外大鼠原代海马神经元的培养体系;2.原代大鼠海马神经元中在转录水平上Sema3F可以抑制VEGF mRNA的表达,并且具有时间依赖性;3.原代大鼠海马神经元中Sema3F可以抑制VEGF蛋白的合成,并且具有时间依赖性。