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目的：本实验通过观察宁心安神方对失眠模型大鼠各脑组织谷氨酸(Glu)、y-氨基丁酸(GABA)及谷氨酸脱羧酶(GAD)和星形胶质细胞谷氨酰胺合成酶(GS)的影响,旨在明确宁心安神方对失眠的治疗作用,阐明宁心安神方对失眠大鼠Glu/GABA-Gln代谢环路的调控机制。方法：本实验采用改良多平台水环境睡眠剥夺法建立失眠模型,将大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。观察大鼠一般情况,利用戊巴比妥钠协同睡眠实验观察大鼠的睡眠潜伏时间和睡眠持续时间,进行模型评价及宁心安神方治疗失眠的疗效评价。高效液相色谱法检测脑干、下丘脑、额叶皮质、海马等脑组织内神经递质Glu、GABA的含量。利用Western Blot法对脑干、下丘脑、额叶皮质、海马等脑组织内蛋白GAD、GS表达水平进行测定。结果：1大鼠睡眠剥脱21天后,睡眠潜伏时间延长、睡眠持续时间减少,同时出现昼夜节律紊乱、白天活动不停等现象,提示失眠模型复制成功。2宁心安神方可以明显缩短失眠大鼠睡眠潜伏时间、延长失眠大鼠睡眠持续时间,中、高剂量组与西药组未见明显差异。随着用药时间的逐渐延长,大鼠白天活动量逐渐减少,与模型组比较有明显的差异。提示宁心安神方可有效改善失眠症状。3高效液相色谱法结果表明,与正常对照组相比,失眠大鼠各脑组织Glu水平有升高趋势,但均差异不明显(P>0.05)；各脑组织GABA水平下降、Glu/GABA比例明显升高,其中脑干、下丘脑表现较为显著(P<0.05)。宁心安神方可提高失眠大鼠脑干、下丘脑GABA水平,降低Glu/GABA的比值。4 Western Blot法结果表明,与正常对照组相比,失眠大鼠脑干、下丘脑GAD蛋白表达均明显降低,GS的蛋白表达有升高趋势,其中下丘脑表现显著(P<0.05)。各组大鼠额叶皮质、海马中GAD、GS的蛋白表达变化不明显。宁心安神方各组均可明显升高脑干、下丘脑中蛋白GAD表达,脑干变化趋势更显著(P<0.05)；下丘脑蛋白GS的表达与模型组、西药组比较则明显减弱(P<0.05)。结论：1改良多平台水环境睡眠剥夺法可成功复制失眠大鼠模型；2脑干、下丘脑的功能异常与失眠的发生关系密切；3宁心安神方治疗失眠的疗效作用与地西泮相当,宁心安神方与地西泮都可以升高失眠大鼠GABA的含量；4宁心安神方可改善Glu/GABA-Gln代谢环路中蛋白GAD、GS勺异常表达,其中对于GS的改善明显优于西药组,体现出中药治疗失眠的多靶点作用。宁心安神方通过调控Glu/GABA-Gln代谢环路从而影响Glu、GABA的合成和分解,影响Glu、GABA的表达水平,改善Glu/GABA的兴奋／抑制代谢失衡,这可能与宁心安神方镇静催眠的疗效机制有关。