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如同其它革兰氏阴性植物病原细菌一样，水稻上两种重要的病原细菌（Xanthomonas oryzae pv.oryzae（简称Xoo）and pv.oryzicola（简称Xooc））也拥有hrp基因。hrp基因决定着植物病原细菌在非寄主植物上激发过敏反应（hypersensitive response，HR）和在感病寄主植物上致病（pathogenicity）的能力。hrp基因还编码组成Ⅲ型泌出系统的蛋白并将效应分子转运至寄主细胞中。harpin是激发非寄主产生HR的蛋白类信号分子。hrp基因发生突变，则丧失上述功能。 本研究用硫酸二乙酯（DES）化学诱变Xoo野生菌株JXOⅢ和PXO99~A及Xooc野生菌株RS105，获得26株三种类型的hrp~-突变体：HR~-/Pth~-/harpin~-，HR~-/Pth~-/Ⅲ~-和HR~-/Pth~±/harpin~-；4株dsp~-突变体。dsp~-突变体丧失致病功能但胞外多糖能够正常产生。野生型菌株和部分hrp~-突变体经细胞超声波破碎和10％水饱和酚法验证，脂多糖LPS不是激发烟草产生HR的信号物质。激发HR的信号物质为蛋白类，其对热稳定，对蛋白酶K敏感。hrp~-突变体的胞外水解酶类（淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、果胶酶和脂酶）活性与野生型菌株相比没有显著差异。hrp~-突变体在hrp诱导培养基上产生的胞外蛋白数目不等。 以E.coli S17-1为宿主菌，以pUFR034为载体而构建的JXOⅢ和RS105基因文库，交叉互补法导入受体菌M55（Xooc hrp~-突变体）中，获得来自JXOⅢ的hrp基因阳性克隆pUHRX245和来自RS105的pUHRS130、pUHRS138和pUHRS662。经酶切和亚克隆分析发现，pUHRX245所携hrp基因片段大小为36.8-kb，pUHRS130、pUHRS138和pUHRS662所携hrp基因片段大小都为39.3-kb，酶切位点相同。在此基础上，构建了36.8-kb和39.3-kb hrp基因片段的限制性酶切图谱。pUHRX245和pUHRS138不仅能功能互补所有的hrp~-突变体恢复激发烟草产生HR，而且可使hrp~-突变体M1005恢复致病性，表型为细 初 耍条斑病症状。 来自pUHAIQ45的36．SAn hrp基因片段，经一系列亚克隆，获得了3．3协Sacl功能片段，能使所有的h件突变体可在烟草上激发HR（来自PXOg吵的帅－突变体M16除外人序列测定结果表明，3．3－kb DNA片段中含完整的bpc基因，另外还含有与热激蛋白卯家族有关的基因卿OAN和仰ON。HSpOKF和恤OM的功能还不清楚。据推测，可能与感应环境温度和植物信号分子有关。 来自 pUHRS138的 39．3七b hrp基因片段，经一系列亚克隆，获得 4．M’bM’bB删dL闷吐功能片段，能功能互补所有的h叶突变体恢复在烟草上激发HR。：序列测定结果表明，4．5－o DNA片段中含有完整 h叭和 h恤C基因。 交叉功能互补研究表明，来自 XoO的 h咖可交叉互补 XOOC h矿突变体，而来自XooC的hrp“和h恤OC不能单独起作用。 h冲渝o和h…地co序列比较发现，与形成a一螺旋一转一a一螺旋有关的序列高度保守。这一基序的上游，在3862位点和273毛94位点，m户h比和坏林OO有所不同。 根据来自 PXO86的 bed。和来自大豆斑疹病菌（XCpV poed）的 hrof基因序列，PCR方法可从仰基因克隆p和pUHRS138以及XOO、Xe中扩增出h叭和hind同源片段，大小与h叭和bud相同。h叭的序列与bed。相同。PCR的扩增结果还显示，bed。在测试的黄单胞茵中较为保守，hrall在测试的植物病原细菌中较为保守。这说明，pUHRX25和 pUHRS138所携hrp基因片段，不仅含有hrp调控基因hrpG和切和乙而且还含有hrp基因簇的帅基因。：