铁死亡（Ferroptosis）是新发现的一种细胞死亡方式,由铁催化以及多聚不饱和脂肪酸的过度氧化所介导,具有独特的形态学、生物化学及遗传学等特征。尽管铁死亡的研究还处于早期阶段,其相关机制仍不清楚,但已有许多研究表明铁死亡与癌症、神经退行性疾病、局部缺血再灌注损伤等疾病有关。与正常细胞相比,肿瘤细胞对铁的需求更高,因而肿瘤细胞更容易发生由铁催化诱导的铁死亡。目前已发现多种药物,如索拉非尼、阿帕替尼、青蒿素及其衍生物等,均是通过诱导铁死亡发挥抗肿瘤作用。因此,通过药物诱导肿瘤细胞铁死亡已经成为治疗肿瘤的新策略之一。全反式维甲酸（ATRA）是动物体内维生素A的代谢中间产物,有着广泛的药理学和生理学活性。目前,ATRA被成功应用于急性早幼粒细胞白血病的治疗,也可在胃癌中与常规化疗药物联用来延长患者总生存期。最新的研究发现,ATRA可以影响铁稳态相关蛋白的表达,如转铁蛋白受体（TFRC）、微量转铁蛋白（MTF）和铁蛋白（Fn）等。另外,ATRA还可以增强索拉非尼诱导的肝癌细胞的铁死亡。基于上述研究背景,本论文在胃癌中探究了铁死亡诱导剂的抗肿瘤作用,并分析了ATRA与铁死亡的相关性以及它对铁死亡诱导剂RSL3抗肿瘤作用的影响。主要研究结果如下:（1）RSL3能够诱导胃癌细胞发生铁死亡采用流式细胞术和SRB法,检测铁死亡诱导剂RSL3和Erastin对胃癌细胞的作用。结果表明,相较于Erastin,RSL3更容易诱导细胞内脂质ROS和总ROS水平上升以及细胞死亡,且这种死亡可以被铁死亡抑制剂Fer-1所抑制,而不能被自噬抑制剂Bafilomycin A1、凋亡抑制剂Z-VAD-FMK和坏死抑制剂Necrostatin-1所抑制。因此,RSL3通过诱导胃癌细胞铁死亡抑制肿瘤生长。（2）ATRA不会引起胃癌细胞铁死亡RNA-seq结果显示,ATRA可以影响HGC-27细胞中铁死亡相关基因的表达,如上调ACSL4、GPX4和TP53等基因的转录水平以及下调TFRC、SLC7A11、ACSL3和FTH1等基因的转录水平。在HGC-27、MKN-1、BGC-823和MGC-803细胞中,Western blot进一步证实ATRA可在一定程度上上调ACSL4的蛋白表达并下调TFRC的蛋白表达,与RNA-seq测序结果一致,但ATRA对GPX4蛋白表达的影响存在细胞差异性。通过流式细胞术和MDA试剂盒检测表明,ATRA对细胞活力、脂质ROS水平、总ROS水平和MDA含量几乎不产生影响,不会诱导胃癌细胞发生铁死亡。（3）ATRA可以拮抗RSL3诱导的铁死亡并存在细胞差异性采用SRB法检测发现,RSL3能够抑制AGS、BGC-823、HGC-27、MGC-803、MKN-1、MKN-45和NCI-N87这7株胃癌细胞的增殖,并呈浓度依赖性。当ATRA和RSL3合用时,ATRA可以拮抗RSL3诱导的HGC-27和MKN-1细胞死亡,而不能拮抗RSL3对其他细胞的作用。通过流式细胞术及MDA试剂盒分别检测细胞活力、脂质ROS水平、总ROS水平以及MDA含量,进一步发现ATRA可以拮抗RSL3诱导的HGC-27和MKN-1细胞铁死亡,而不能拮抗RSL3诱导的BGC-823和MGC-803细胞铁死亡。Western blot检测发现,RSL3可显著下调GPX4的蛋白表达。ATRA可以拮抗RSL3在HGC-27和MKN-1细胞中对GPX4的下调作用,而在BGC-823和MGC-803细胞中不能拮抗RSL3对GPX4的下调作用。因此,ATRA可能是通过上调GPX4蛋白表达来拮抗RSL3诱导的铁死亡。此外,ATRA还可以部分拮抗RSL3对细胞克隆形成能力和细胞周期阻滞的影响,亦存在细胞差异性,这与其拮抗RSL3诱导铁死亡的作用相一致。（4）体内实验进一步证实ATRA能够拮抗RSL3的抗肿瘤作用构建HGC-27裸鼠移植瘤模型,在体内进一步分析ATRA和RSL3合用的抗肿瘤作用。实验结果表明,与空白对照组相比较,ATRA单药组对肿瘤生长几乎无抑制作用,RSL3单药组明显抑制了肿瘤生长。与RSL3单药组相比较,ATRA和RSL3合用组肿瘤体积不仅没有减小,反而有一定程度的增大,这一结果表明ATRA拮抗了RSL3的抗肿瘤生长作用。通过检测小鼠瘤组织进一步证实,RSL3下调了GPX4表达并提高了MDA水平,而ATRA能够拮抗RSL3引起的MDA水平的上升并恢复GPX4蛋白表达。实验中小鼠体重均无显著性差异且小鼠生长状态良好,表明药物无明显毒副作用。综上所述,RSL3通过诱导胃癌细胞铁死亡发挥抗肿瘤作用,ATRA不能诱导胃癌细胞发生铁死亡,但可以通过上调GPX4的蛋白表达以及抑制细胞内脂质过氧化水平上升来拮抗RSL3在胃癌细胞中诱导的铁死亡,并且存在显著的细胞差异性。