新的NK细胞功能相关分子CD226和凋亡诱导配体的表达及其与免疫功能的关系

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目的:研究CD2 2 6分子和凋亡诱导配体(apoptosisinducing ligand,AIL)在NK细胞CD56亚群和CD56亚群上的表达规律和功能.方法:(1)分别以IL-2或/和IL-15活化外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PB MC),经混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture,MLC)活化的淋巴细胞,以及超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A/B(Staphylococcus enterotoxin A/B,SEA/B)活化PB MC为模型,应用双重免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察不同活化模型中CD226分子在NK细胞CD56和CD56亚群表达的变化,与NK细胞其他活化性受体和抑制性受体的共存关系,以及在超抗原活化PB MC模型中,膜型AIL在NK细胞亚群中的表达规律;另外,还观察了自体外周血造血干细胞移植患者造血重建过程中CD226分子在NK细胞亚群中的表达规律.(2)采用<51>Cr释放试验及抗体阻断实验,观察不同活化模型中NK细胞亚群的功能与CD226分子和AIL表达的关系.(3)利用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),检测不同浓度IL-2或IL-1 5活化PBMC和MLC活化的淋巴细胞的培养上清中IFN-γ的水平,以及不同浓度超抗原作用不同时间,PBMC培养上清中可溶型AIL的水平.(4)在超抗原活化模型中,利用激光共聚焦显微镜,观察CD226分子和膜型AIL在NK细胞杀伤相的分布.结论:CD226分子作为NK细胞上一种新的活化性受体,其表达受细胞因子网络的调节;在不同免疫状态和疾病下,CD226分子在NK细胞CD56和CD56亚群中的分布有所变化,并可能参与NK细胞免疫突触的形成;超抗原活化NK细胞可能利用膜型和可溶型AIL参与NK细胞的杀伤功能和免疫调节功能.
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