论文部分内容阅读
本文以低压层析提纯植物天然产物为目的,通过选择层析介质实现低压条件下的制备层析操作,再利用不同层析步骤间的优化组合达到高纯度、高回收率的分离提纯效果。研究内容涉及草药蛇足石杉中两个目标产物石杉碱甲和石杉碱乙的同时分离纯化,通过浸提及三步低压层析的过程优化组合,实现了两者的简捷、高效提纯。 论文首先选择了专一性好的腈基HPLC柱(Inertsil CN-3),结合固相萃取,建立了适合的目标产物的快速、准确、重现性好的HPLC分析检测方法,作为在分离过程的跟踪检测目标产物的手段。 研究了蛇足石杉的浸提条件,发展了简单有效的浸提方法,即用1%硫酸室温浸泡两次,每次一天,固液比分别是1:10和1:5(w/v)。浸出液中石杉碱甲和石杉碱乙的平均回收率分别为95.2%和96.8%。 研究了大孔吸附树脂层析取代多步的液液萃取操作进行浸出液的富集浓缩过程,筛选了一系列树脂,确定了CBJ-23作为初分离的介质。优化了CBJ-23大孔吸附树脂层析的条件,使石杉碱甲和石杉碱乙的含量分别从0.188%和0.079%提高到了1.72%和0.734%,纯化倍数均>9;最后产物的回收率分别达到了92.3%和93.1%。 从大孔吸附树脂层析初分离得到的粗品出发,参照文献研究了硅胶正相层析的分离纯化效果,表明由于分辨率低,且存在产物的不可逆吸附,石杉碱甲的回收率和纯度都很低,而石杉碱乙得不到有效回收。 探索了反相层析分离纯化粗品中石杉碱甲和石杉碱乙的工艺。首先以通用型的C18键合硅胶介质YWG C18探索了反相层析对粗品分离纯化效果,结果表明石杉碱甲和石杉碱乙在C18硅胶上可以得到部分分离,但分离度较低,因此产物的纯度和回收率均不理想;用新型的PST介质代替传统的C18键合硅胶介质反相