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目的:探讨重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(recombinant human tumor necrosis factor-alphareceptor II:Ig G Fc,rhTNFR:Fc)是否能够减轻高糖作用下大鼠肾小球内皮细胞(Rat glomerular endothelial cells,RGECs)坏死性凋亡的发生,进而减轻细胞死亡、炎症反应及损伤,并探讨其机制。方法:对RGECs进行体外培养,用凝血因子VIII鉴定为内皮细胞后,将其根据不同干预条件随机分为以下四组:正常组(5.5mmol/L葡萄糖)、甘露醇组(5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇)、高糖组(30mmol/L葡萄糖)和高糖+150ng/ml rhTNFR:Fc组(30mmol/L葡萄糖+150ng/ml rhTNFR:Fc)。采用免疫细胞化学、免疫荧光检测各组TNF-α、RIP1、RIP3和IL-6的蛋白表达定量及定位;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组TNF-α、RIP1、RIP3和IL-6的m RNA表达情况;采用蛋白印迹法(WB)检测各组TNF-α、RIP1、RIP3和IL-6的蛋白表达情况。结果:1.培养的大鼠肾小球细胞胞浆内可表达凝血因子VIII,鉴定为内皮细胞。2.免疫细胞化学:TNF-α、RIP1、RIP3和IL-6主要在RGECs的胞浆中表达,高糖组的表达量明显多于正常组和甘露醇组(P值均<0.01),而高糖+150ng/ml rhTNFR:Fc组的表达较高糖组明显减少(P<0.01),而其余组之间上述指标的表达无差异(P>0.05)。3.免疫荧光:TNF-α、RIP1、RIP3和IL-6主要在RGECs的胞浆中表达,高糖组的荧光明显强于正常组和甘露醇组。而高糖+150ng/ml rhTNFR:Fc组的荧光明显弱于高糖组,其余组之间无明显亮度差异。4.RT-PCR:高糖组,TNF-α、RIP1、RIP3和IL-6的m RNA相对表达量明显多于正常组及甘露醇组(P值均<0.01),而高糖+150ng/ml rhTNFR:Fc组的表达较高糖组明显减少(P<0.01),其余组之间上述指标的表达无差异(P>0.05)。5.WB:高糖组,TNF-α、RIP1、RIP3和IL-6的蛋白表达量明显多于正常组和甘露醇组(P值均<0.01),而高糖+150ng/ml rhTNFR:Fc组的表达较高糖组明显减少(P<0.01),其余组之间上述指标的表达无差异(P>0.05)。结论:RGECs在高糖刺激下,发生坏死性凋亡明显增多,进而发生了较明显的炎症反应和损伤,而使用了rhTNFR:Fc干预后,TNF-α、RIP1、RIP3和IL-6的m RNA和蛋白表达均下调,说明rhTNFR:Fc可能通过抑制TNF-α在RGECs的表达,进而部分阻断坏死性凋亡途径,减轻了RGECs的炎症反应和损伤。