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从烟叶种植到卷烟加工的过程中都会有大量烟草废弃物产生,这些废次烟草中含有多种有用物质,具有很高的利用价值。作为医药行业的重要原料,国内外对于烟草中的高附加值活性成分茄尼醇的需求量日益增加,但相关研究的滞后限制了其在制药领域的应用。鉴于此,本文对废次烟草中茄尼醇的超临界CO2萃取技术开展研究,探索茄尼醇的纯化方法及抗氧化活性检测方法,为深入拓展其应用奠定基础。
首先,围绕萃取压力、萃取时间、解析温度等因素对超临界CO2萃取烟草中茄尼醇萃取率的影响进行了实验和分析。结合水洗、皂化等预处理措施,通过正交实验得到了萃取茄尼醇的最佳工艺条件,即以体积分数90﹪的乙醇为夹带剂,在萃取压力为35MPa、萃取温度为50℃、解析温度为40℃时,萃取时间3h后,茄尼醇萃取率达98.53﹪,纯度为40.14﹪。方法的相对标准偏差RSD为0.52﹪(n=4),工艺具有较好的可靠性与重复性。
其次,通过薄层层析和柱层析实验对超临界产物的纯化进行了研究。选取了10种溶剂体系进行薄层层析展开剂的选择实验,以正己烷-乙酸乙酯(4∶1)体系最适宜作为分离茄尼醇超临界CO2萃取产物的展开剂。柱层析纯化实验中以该溶剂体系作为洗脱剂,超临界产物的纯度从36.73﹪提高至61.70﹪,茄尼醇回收率为80.55﹪。
此外,为了克服现有研究中对于茄尼醇体外抗氧化活性研究的不足,论文采用邻苯三酚自氧化法和Fenton反应对茄尼醇清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力进行了检测,与VC进行了对比,并进行了茄尼醇与VC混合体系的清除能力实验。结果表明,茄尼醇对二者都有一定的清除能力,对后者的作用更为明显,高浓度下的作用优于VC。茄尼醇与VC的混合体系在一定浓度范围内对于羟基自由基的清除可能具有协同作用。