浙贝母饮片及质量标准和高速逆流色谱分离纯化技术的研究

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本文以中药材浙贝母为研究对象,通过生药学研究、饮片炮制工艺研究、质量标准等全面系统的研究工作,制定了浙贝母饮片的炮制工艺以及质量控制方法与标准,首次将高速逆流色谱-蒸发光散射检测器(HSCCC-ELSD)联用技术应用于浙贝母中贝母素甲和贝母素乙的分离纯化。 浙贝母(BulbusFritillariaeThunbergi)为百合科植物浙贝母FritillariathunbergiiMiq的干燥鳞茎,味苦,性寒,能清热化痰,开郁散结,可用于风热,燥热,痰火咳嗽,肺痈,淋巴结核。浙贝母中的主要成分和有效成分为甾体生物碱浙贝碱(贝母素甲)、去氢浙贝碱(贝母素乙)以及微量的贝母新碱、贝母芬碱、贝母定碱、贝母替定碱等生物碱及其苷。 生浙贝母的炮制方法中考察了切片工艺和干燥工艺,以含水量和贝母素甲、贝母素乙的总含量为考核指标,兼顾“少浸多润”的原则和节能,经正交实验,确定了生浙贝母的炮制工艺。 以2005版《中国药典》为参照,对饮片的杂质、水分、灰分、浸出物、农残量、重金属、有效成分的含量等多项内容进行了实验,并制定了可控的标准,为更好的保障饮片质量的稳定性,为饮片的生产与销售、开发以及应用提供技术保证。并对浙贝母饮片的HPLC指纹图谱进行了探索性的研究,为完整的指纹图谱的制定打下了基础。 在HSCCC实验中,采用TLC预实验对HSCCC的溶剂系统进行初步筛选,运用正交设计实验方法选择最优的参数条件。以氯仿—乙醇-0.2M盐酸溶液(3:2:2)为溶剂体系,主机转速为900r/min,流动相流速为1.0ml向in,从浙贝母粗提物中分离得到贝母素甲和贝母素乙。用HPLC-ELSD法,测定两者纯度分别为97.5%和94.5%;经MS、1HNMR证实其结构。高速逆流色谱的应用研究表明:仪器操作简单;对样品的预处理要求低,样品的回收率高,可以实现连续、高效、自动的分离与制备中药对照品,有很广阔的应用前景。
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