论文部分内容阅读
促黄体素是一种重要的促性腺激素,对于维持雌性和雄性动物的繁殖能力来说具有很重要的作用,尤其是哺乳动物的排卵主要依靠促黄体素的作用。本课题以促黄体素β亚基基因的多态性为研究内容,旨在探索该候选基因与小尾寒羊高繁殖力之间的关系,为我国开展小尾寒羊高繁殖力的遗传学基础研究提供科学依据。 应用PCR-SSCP技术对两组样本进行促黄体素β亚基基因序列(1686bp)多态性分析:一组为243头有产羔记录的小尾寒羊的血样;另一组为四个无产羔记录的绵羊品种的血样。得到如下结果:在5’区709bp长的片段上,4个位点中有2个位点存在突变,即LH β 5’-2,LHβ 5’-4。LH β 5’-2位点有5种基因型(AA、AB、BB、CC、AC),三种等位基因(A、B和C);LH β 5’-4位点有3种基因型(AA、AB、AC),也是三种等位基因。2个外显子(exon2和exon3)中,外显子2存在突变,具有两种基因型(AA、AB),两种等位基因(A、B)。在所检测的小尾寒羊个体中,外显子1的22个碱基包括一段很短的非翻译区和编码部分信号肽的序列,这于所研究的繁殖性状没有意义,没有进一步做多态性分析。对5’区的2个突变序列和1个外显子的突变序列分别作克隆和测序分析,结果如下:在LH β 5’-2有A→G(-424),T→C(-271);LH β 5’-4序列中有G→A(-6),C→G(+53);外显子2的序列中有G→C(+332)。 利用TFSEARCH ver1.3软件对促黄体素β亚基基因5’区序列的调控因子结合情况进行预测,结果表明5’调控区的碱基突变前和突变后,引起了所结合转录因子的不同,尤其是落在LHD 5’-2区内的A→G(-424),T→C(-271))突变引起的调控因子变化明显。外显子2的碱基突变使丙氨酸替代了甘氨酸,但没有出现氨基酸二级结构的变化。 在有产羔记录的小尾寒羊中,各变因与繁殖性状关系的最小二乘分析结果表明:绵羊产羔的胎次对繁殖性能的影响都达到了极显著水平;LH β 5’-2的不同基因型对繁殖性能的影响达到了极显著水平。在无产羔记录的四个品种绵羊中,通过卡方分析表明:LH β 5’-2和exon2位点的不同基因型在品种间都分别达到了差异显著水平。本研究所发现的LH β 5’-2的多态性可能与繁殖性状有关。