论文部分内容阅读
蔓枯病是由亚隔孢壳属的Didymella. bryoniae(Auersw.)(=Mycosphaerella citrullina(C.O.Sm.)Gross)引起的一种真菌性土传病害,可危害甜瓜、黄瓜、哈密瓜、西瓜、西葫芦等至少12个属,23种葫芦科作物。蔓枯病对我国乃至世界甜瓜生产的危害日益严重,尤其在设施栽培中。由于化学防治的局限性日益突出,选育抗病的栽培品种已成为最经济有效防治蔓枯病的措施。目前的抗蔓枯病的甜瓜品种仅携带单个抗病基因,随着蔓枯病菌生理小种的变异,导致这些抗性品种的抗性不足,甚至失去抗性,因此培育聚合多个抗蔓枯病基因的甜瓜品种成为了甜瓜育种者的选择。本文首次利用多个甜瓜蔓枯病抗源杂交获得了聚合抗源,对其抗性鉴定表明聚合抗源抗性得到了显著提高。并利用145-471 F1连续自交获得了聚合基因稳定的一份聚合抗源。同时,我们利用聚合抗源145-398与哈密瓜商品种“白皮脆”杂交、回交,利用分子标记辅助选择,获得了抗蔓枯病且商品性良好的哈密瓜株系。具体研究如下：1.甜瓜蔓枯病抗性基因聚合及其防卫基因的表达分析利用甜瓜蔓枯病抗源PI140471、PI157082、PI511890、PI482398、PI482399和PI420145相互杂交,获得了8份抗蔓枯病聚合抗源。利用表型鉴定,在采用梯度浓度孢子液接种鉴定的基础上,利用RT-PCR技术研究了接种后苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因、抗坏血酸氧化酶(APX)基因、几丁质酶(CHT)基因等防卫基因在聚合基因材料中的表达情况。结果显示,890-398 (PI511890×PI482398)、145-471(PI420145 ×PI140471)抗性最高。防卫基因在聚合基因材料中高表达或早表达,为其提供了较高的抗性。本文创制的聚合基因材料可用于甜瓜的抗蔓枯病聚合育种,对甜瓜抗病育种具有重要意义。2.甜瓜蔓枯病聚合抗源的选育及相关SCAR标记的转化以含有单个抗蔓枯病基因的抗源PI420145 (Gsb-6)、PI140471 (Gsb-1)为材料杂交,所得F1连续自交多代,利用分子标记辅助选择的方法筛选聚合抗性基因Gsb-1和Gsb-6的目的单株。其中将与Gsb-6连锁的AFLP标记E-TG/M-CTC200转化为SCAR标记SGSB1800,能够迅速、简便的用于分子标记辅助选择,大大提高了甜瓜抗蔓枯病新品种的选择效率。3.分子标记辅助甜瓜抗蔓枯病育种材料的选择以高感蔓枯病的哈密瓜自交系“白皮脆”为母本,聚合抗源145-398为父本,杂交获得F1,再以“白皮脆”为轮回亲本进行连续回交2代,且BCl和BC2都经苗期蔓枯病接种鉴定结合分子标记辅助选择,选取聚合2份抗蔓枯病基因且高抗蔓枯病的单株,并对BC2回交单株测定果实性状。结果表明,BC2的果实品质优良,与“白皮脆”果实无显著差异,且表现高抗蔓枯病。