巫山淫羊藿E．wushanense T．S．Ying主产于陕西、四川、贵州等地，是《中国药典》2005年版收载的淫羊藿药材的植物来源之一。目前在陕西省有明确记录的为陕西安康市、平利县和镇平县，且资源丰富，储藏量大，具有研究开发的资源优势。目前巫山淫羊藿的研究较少，且主要集中于地上部分，报道仅见其地上部分化学成分的分离及含量测定，而其根的系统研究少有报道，另一方面，巫山淫羊藿根在民间俗称“小黄连”，广泛用于平喘、抗炎和抗菌。本研究内容主要分三部分：第一部分：巫山淫羊藿根中化学成分分离与分析1．通过硅胶柱层析及葡聚糖凝胶纯化，利用不同的洗脱体系对巫山淫羊藿根的化学成分进行分离，得到十二种单体化合物，然后利用UV、IR、NMR、MS、COSY和NOE等技术鉴定了其中8种化合物的结构，分别为双藿苷A、淫羊藿属苷A、朝藿定C、淫羊藿苷、淫羊藿属苷C、意卡瑞苷A、去多甲基羟基淫羊藿素和齐墩果酸，除淫羊藿苷外，均为首次从该植物的根中分离得到，其它4种化合物F2、F3、F4和F12正在鉴定中。2．经过鉴定和色谱图的仔细比对，证明原来确定的柔藿苷结构有误，应为朝藿定C。3．研究了巫山淫羊藿中多种黄酮的含量测定方法，建立了梯度洗脱RP-HPLC同时测定巫山淫羊藿中7种黄酮的含量测定方法。测定了不同部位、不同产地、不同叶龄的巫山淫羊藿中黄酮的含量；考察了十种不同品种淫羊藿中黄酮的含量；考察了生长期巫山淫羊藿中朝藿定C和淫羊藿苷的动态积累规律。4．为2010年版中国药典一部巫山淫羊藿含量测定项的修订工作进行了基础研究。研究表明，巫山淫羊藿叶中以朝藿定C含量为最高，远远大于现行检测指标淫羊藿苷的含量，不同部位主要成分的含量差异较大。生长期任一月份巫山淫羊藿中朝藿定C的含量远远大于淫羊藿苷，两者之间有一定的相关性，建议中国药典2010年版将其单列对待。第二部分：巫山淫羊藿应用技术研究(提取工艺)通过比较研究几种提取方法，获得了以淫羊藿苷为指标，含量＞50％的总提取物。经研究，以LSA-20大孔树脂纯化巫山淫羊藿总提取物，所得产物纯度高，工艺简单、提取效率高，适合工业化的大生产，其应用技术已申报发明专利。第三部分：巫山淫羊藿有效成分生物活性研究在完成巫山淫羊藿根中化学成分系统分离的基础上，对巫山淫羊藿有效成分的生物活性进行了探索。1．研究了巫山淫羊藿提取液及巫山淫羊藿根中7种8-异戊烯基黄酮类单体成分体外抗氧化作用，实验结果显示，巫山淫羊藿提取液及巫山淫羊藿根中的8-异戊烯基黄酮类单体成分对DPPH自由基具有很强的清除作用，表明这7种黄酮类化合物及巫山淫羊藿提取液具有明显的抗氧化作用，其中去多甲基羟基淫羊藿素和淫羊藿属苷C具有较强的抗氧化活性，其抗氧化活性几乎可与维生素C相媲美，明显强于其他五种黄酮类化合物。2．研究了巫山淫羊藿主要成分的抗菌作用，实验表明，以铜绿甲单孢细菌为目标菌，在固体培养基中双藿苷A、意卡瑞苷A和去多甲基羟基淫羊藿素对铜绿甲单孢细菌具有显著的抗菌活性。值得注意的是：在液体培养体系中双藿苷A对铜绿甲单孢细菌也具有显著的抗菌活性，这可能在一定程度上为民间将巫山淫羊藿根作为“小黄连”应用提供了理论来源，尤其具有理论指导意义的是：双藿苷A在液体培养体系中的抗菌作用是通过直接抑制毒性基因的表达而非细胞的生长。这种抑菌机理不易产生抗药性，因此，作为一种新型的植物抗生素化合物前体成分，双藿苷A及其结构修饰物的抗菌作用具有更大的期望价值和实际应用意义。