【摘 要】
:
肝素是一种重要的多糖类抗凝血药物,临床上被广泛用于血栓栓塞、心肌梗塞、血液透析等。目前市场上的肝素主要从猪小肠中提取,但是动物源肝素易受污染,所以需要寻求一种更加
论文部分内容阅读
肝素是一种重要的多糖类抗凝血药物,临床上被广泛用于血栓栓塞、心肌梗塞、血液透析等。目前市场上的肝素主要从猪小肠中提取,但是动物源肝素易受污染,所以需要寻求一种更加安全可靠的肝素制备方法。Heparosan是一类天然酸性多糖,在E.coliK5里以荚膜多糖的形式合成,其与肝素和硫酸乙酰肝素有类似多糖骨架,因此可以通过生物工程技术从heparosan出发制备肝素。本课题以提高E.coliK5生物量和heparosan产量为目的,对培养基和发酵补料方式进行了优化并应用Red同源重组技术敲除了rpoS基因以期减少乙酸的产生。同时为能更便捷的定量E.coli K5发酵产物中的heparosan,在Heparin lyase Ⅲ法的基础上进行了优化使之能直接应用于发酵上清液的检测。通过单因素试验,在葡萄糖合成培养基的基础上对碳源、氮源、磷酸盐和接种量进行优选。对不同的补料方式进行了比较研究,结果表明用氨水调pH的拟指数流加发酵方式的效果最好,E.coli K5生物量和heparosan产量达到5.4 g/L和1.3 g/L,比批次发酵分别提高了138%和 798%。Heparin lyase Ⅲ法是利用Heparin lyase Ⅲ能特异性解聚heparosan的特性定量检测heparosan的酶学方法,但原方法只适用于heparosan粗品。所以在原方法的基础上对检测条件进行了优化,使其能直接检测发酵上清液中的heparosan含量。利用λ-Red重组系统成功敲除了E.coliK5的rpoS基因,通过摇瓶培养比较了野生株和突变株在葡萄糖合成培养基中的生长状况,发现突变株产酸明显减少,但生物量和heparosan产量没有提高。
其他文献
2000年6月17日,由中国特种动植物养殖开发扶贫委员会主办,在安徽蚌埠市召开的“全国肉用犬养殖发展专业会议”上,江苏沛县樊哙鼋汁狗肉制品厂的“樊哙鼋汁狗肉”被评为名牌产品,
县城是江南最小的城市。唐五代不少县城是前朝留传下来的,但也有不少是通过析置新设立的县城,江南共约有县城70多座。县城的分布并不均衡,江南北部地区分布密度较高。大多数的县城规模不大,在二里左右,超过三里的一般认为是较大的县城。县城大多建有城墙,高度最为常见的在一丈二尺至一丈五尺之间,厚度在一丈左右。为了保护县城,在城墙外有护城河。一般以四座城门最为多见,城门上建有城楼。县城中实行坊市制,市建在县城的主要河道边;坊与坊之间,以及通向各个城门,有较为宽广的道路。县城内部有河道穿越,和护城河构成一个相互贯通的水系
杭州市技术合同效益跟踪100例述评沈荣发,周军社会主义市场经济的迅速发展为科技工作带来了前所未有的活力和生机。顺应改革开放时势孕育和发展的技术市场,已经成为加快科技成果推
随着电竞行业的发展,国民对电竞这一观念也在不断更新迭代。当然,电竞行业的发展也衍生一些与之相关的职业。任何事物都有一把双刃剑,毕竟在电竞行业发展还不够完全成熟的现
民营科技企业发展的几个问题国家科委顾问谢绍明1993年郑州会议以后,民营科技企业的发展势头迅猛。但是要真正实现我国民营科技企业上规模、上水平、产业化仍然是一个艰巨的过程。
通过筛选16S rDNA序列库,设计了一对双歧杆菌属特异性引物P175和P874在试验确定的反应条件下,该引物对能正确区分双歧杆菌和非双歧杆菌。RAPD技术用于种及菌株的鉴定。选用10种
我国强激光物理研究取得重大进展我国科学家经过多年研究,在强激光物理领域已取得一批国际首创的研究成果,标志着我国强激光物理科研获得重大进展。中科院上海分院新近介绍,这批
出土文獻習見從子之例,如“乳”“乳(孺)子”合文、“塚(冢)子”合文,以及“字”形之字。由於字形高度相似,“乳(孺)子”合文有時會被誤認爲“塚(冢)子”合文。因形體簡省過
《明君》“疏縠之冠者”中的“疏縠”應讀爲“紗縠”,指精細、輕薄的絲織品。《戰國縱橫家書》“秦挾(楚)、趙之兵以復攻”中的“挾”實爲“收”字,爲“聚集”義。《五星占》
目的分析消化内科患者幽门螺杆菌感染现状及其与胃肠疾病间的相关性,以期控制感染率、降低胃肠疾病发生率。方法选取2014年3月-2016年4月医院消化内科患者184例,其中幽门螺杆