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第一部分 一氧化氮含量变化与细胞凋亡在激素性股骨头缺血坏死中作用的实验研究目的 在建立激素性股骨头缺血坏死动物模型的基础上,探索一氧化氮含量变化与骨细胞凋亡在激素性股骨头坏死中的作用。方法5月龄日本大耳白兔40只,雌雄不限,体重2.5±0.5kg,随机分为A(激素+内毒素组)、B(单纯激素组)、C(单纯内毒素组)、D(空白对照组)四组。造模成功后,心脏采血,离心后检测血清中一氧化氮含量;取双侧股骨头常规固定脱钙待,HE染色计数空骨陷窝、电镜观察骨细胞形态变化、TUNEL法检测骨细胞凋亡。结果1、A组空骨陷窝率明显高于B组、C组、D组,经统计分析具有显著差异(P<0.01),B组、C组、D组间无显著性差异。2、A组NO含量明显高于B组、C组、D组,经统计分析具有显著差异(P<0.01),B组、C组、D组间无显著性差异。3、A组细胞凋亡指数明显高于B组、C组、D组,经统计分析具有显著差异(P<0.01),B组、C组、D组间无显著性差异。4、NO含量与骨细胞凋亡指数呈正相关(r=0.707)。结论1、A组空骨陷窝率明显高于B组、C组、D组。2、在激素性股骨头发生缺血坏死的过程中NO含量增高,骨细胞凋亡指数增高,NO含量与骨细胞凋亡在激素导致股骨头坏死中起着重要作用。3、NO含量与骨细胞凋亡指数呈正相关,NO能诱导细胞凋亡的发生。第二部分 骨髓造血细胞DNA氧化损伤与骨细胞凋亡在激素性股骨头缺血坏死中作用的实验研究目的 在建立激素性股骨头缺血坏死动物模型的基础上,探索骨髓造血细胞DNA氧化损伤与骨细胞凋亡在激素性股骨头坏死中的作用。方法5月龄日本大耳白兔40只,雌雄不限,体重2.5±0.5kg,随机分为A(激素+内毒素组)、B(单纯激素组)、C(单纯内毒素组)、D(空白对照组)四组。分别于最后一次给药后第二周、第四周处死实验动物,每次每组5只;取双侧股骨头常规固定脱钙待测,HE染色计数空缺骨陷窝、电镜观察骨细胞形态变化、TUNEL法检测骨细胞凋亡、免疫组织化学法检测骨髓造血细胞DNA氧化损伤。结果第二周时:1、A组空缺骨陷窝率明显高于B组、C组、D组,经统计分析具有显著差异(P<0.01),B组、C组、D组间无显著性差异。2、A组骨髓造血细胞DNA氧化损伤率明显高于B组、C组、D组,经统计分析具有显著差异(P<0.01),B组、C组、D组间无显著性差异。3、A组、B组、C组、D组间细胞凋亡指数无显著性差异(P>0.05),凋亡指数在正常范围。第四周时:1、A组空缺骨陷窝率明显高于B组、C组、D组,经统计分析具有显著差异(P<0.01),B组、C组、D组间无显著性差异。2、A组骨髓造血细胞DNA氧化损伤率明显高于B组、C组、D组,经统计分析具有显著差异(P<0.01),B组、C组、D组间无显著性差异。3、A组细胞凋亡指数明显高于B组、C组、D组,经统计分析具有显著差异(P<0.01),B组、C组、D组间无显著性差异。第四周时空缺骨陷窝率与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.893)。结论 1、在激素性股骨头缺血坏死早期,骨髓造血细胞DNA氧化损伤发生于骨细胞凋亡之前。2、在激素性股骨头发生缺血坏死的过程中骨髓造血细胞DNA氧化损伤与骨细胞凋亡在激素导致股骨头坏死中起着重要作用。3、第四周时A组空缺骨陷窝率与骨细胞凋亡指数呈正相关。