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高速逆流色谱(high-speedcounter-currentchromatography，简称HSCCC)是20世纪80年代发展起来的一种液液分配色谱技术，与其它色谱技术不同的是它不需要任何固态载体，因而避免了分离样品与固态载体表面因发生化学反应而造成的失活、变性、污染及不可逆吸附等不良情况，它还具有高效、快速、上样量大、回收率高等优点，所以特别适合于天然产物的分离与纯化。经过近30年的发展，随着其理论与技术的日益发展与完善，HSCCC已在生物、医药、食品、材料、农业、环保等领域获得了广泛的应用，尤其是在中药有效成分的分离纯化领域已成为最有优势的分离分析方法之一。
拥有两千多年悠久历史的传统中药为中华民族的生存繁衍做出了不可磨灭的贡献。在当今世界“回归自然”思潮的影响下，中药正以其丰富的资源、独特的疗效、毒副作用小等优点越来越受到世人的青睐。传统中药与西药相比最大缺点是产品质量不稳定、质量得不到保证、质量控制缺乏量化的标准、说服力不强，这也是中药现代化之路的最大障碍。因此采用现代科学技术手段研究中药、阐明其产生疗效的物质基础、健全中药材及其制剂标准规范体系已成为中药研究中刻不容缓的任务。
目前，中药活性成分分离纯化方法主要有制备型高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography,HPLC)、柱层析及HSCCC等。将HSCCC应用于中药研究可以实现：(1)高纯度药用成分对照品的制备；(2)配合活性跟踪入药部位的设计逐级分离制备活性成分；(3)为中药材和中药方剂指纹图谱的建立提供更丰富或准确的信息和数据；(4)进行中试批量生产和工业生产。
本文应用HSCCC，采用优化的实验条件对常用中药吴茱萸、虎杖、五味子、卷柏中的有效成分进行了分离纯化，经HSCCC分离所得化合物的纯度由HPLC检测均大于95％，化学结构经核磁共振氢谱(1H-NMR)与碳谱(13C-NMR)得到了鉴定。为上述中药的药理研究与开发、中药及其制剂的鉴别及质量控制提供了参考。
一、HSCCC分离纯化吴茱萸生物碱类成分的研究
建立了HSCCC分离纯化吴茱萸中生物碱类化合物的方法。使用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5:5:7:5，v/v)的上相为固定相，下相为流动相；流速：2.0mlmin-1；转速：900rpm；检测波长为254nm；从180mg吴茱萸粗提物中一步分离得到吴茱萸碱28mg、吴茱萸次碱19mg、吴茱萸新碱21mg、1-methy-2-[(6Z、9Z)]-6，9-pentadecadienyl-4-(1H)-quinolone16mg、1-methyl-2-dodecyl-4-(1H)-quinolone12mg；纯度分别为98.7％，98.4％，96.9％，98.0％，97.2％。上述化合物结构经1H-NMR与13C-NMR得到了鉴定。
二、HSCCC分离纯化虎杖有效成分的研究
建立了HSCCC分离纯化虎杖中五种有效成分的方法。虎杖粗提物经两相溶剂体系石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2∶5∶4∶6，v/v)的上、下相分配，上相得到样品1，下相得到样品2。使用石油醚-乙酸乙酯-水(1∶5∶5，v/v)的上相为固定相，下相为流动相；流速：1.5mlmin-1；转速：700rpm；波长：254nm；从200mg样品1中分离出19.3mg白藜芦醇苷和17.6mg大黄素-8-O-β-D-葡萄吡喃糖甙，纯度分别为97.5％和97.1％。使用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶5∶4∶6，v/v)的上相为固定相，石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶5∶4∶6，v/v)和石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶5∶7∶3，v/v)的下相为流动相实现梯度洗脱；流速：1.5mlmin-1；转速：700rpm；波长：254nm；从220mg样品2中分离出18.5mg白黎芦醇，35.3mg大黄素，8.2mg大黄素甲醚，经HPLC分析，其纯度分别为98.7％，99.3％，98.5％。上述化合物结构经1H-NMR与13C-NMR得到了鉴定。
三、HSCCC分离纯化五味子木质素类成分的研究
建立了HSCCC分离纯化五味子中木质素类成分的新方法。使用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(5∶5∶6∶4，v/v)的上相为固定相，下相为流动相；流速：2.0mlmin-1；转速：900rpm；波长：254nm；从200mg五味子粗提物中分离得到了五味子素12mg、五味子乙素9mg，经HPLC测定纯度分别为95.1％、96.9％。上述化合物经与对照品的光谱数据对照得到了鉴定。
四、HSCCC分离纯化卷柏双黄酮类成分的研究
建立了HSCCC分离纯化了传统卷柏中的双黄酮类成分的方法。使用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶5∶4∶5，v/v)的上相为固定相，下相为流动相；流速：2.0mlmin-1；转速：750rpm；波长：254nm；从100mg卷柏提取物中制得穗花杉双黄酮37mg，经高效液相色谱分析，纯度为99.5％。上述化合物结构经1H-NMR与13C-NMR得到了鉴定。