论文部分内容阅读
慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia, CML)是一类血液系统恶性肿瘤。羟基脲(hydroxyurea, HU)是CML的首选化疗药物之一；干扰素-a(interferon-alpha, IFN-α)是造血系统恶性肿瘤和淋巴瘤的有效生物治疗剂；但CML细胞对二者均呈现抗性。谷胱甘肽转硫酶(glutathione S-transferases Pi, GSTPi)是Ⅱ相药物代谢酶成员,可能参与了CML细胞对化疗和/或生物治疗剂的抗性形成过程。目的：本课题是以CML细胞株(K562、KT-1/A3和KT-1/A3R)细胞为实验模型,研究HU、IFN-α或二者联合对CML细胞增殖、凋亡的影响,分析经HU、IFN-α单独或联合作用前、后的CML细胞的GSTPi的表达差异,探讨GSTPi在CML细胞对化疗和/或生物治疗剂的抗性形成过程中的作用及其可能机制。方法：1.细胞计数分析K562、KT-1/A3和KT-1/A3R细胞对照组和加药组的细胞生长状态,绘制细胞生长曲线；2.MTT法检测K562、KT-1/A3和KT-1/A3R细胞对照组和药物作用48小时后的生长抑制率；3.流式细胞术检测K562、KT-1/A3和KT-1/A3R细胞周期和细胞凋亡率；4. RT-PCR及Western-blotting检测K562、KT-1/A3和KT-1/A3R细胞的对照组和加药作用48小时后的GSTPi表达水平。结果：1.HU可以抑制K562、KT-1/A3和KT-1/A3R细胞的增殖和促进其凋亡,与对照组比较均具有统计学显著性(P<0.01)；2.HU联合IFN-a可以协同抑制K562、KT-1/A3和KT-1/A3R细胞增殖,并诱导CML细胞凋亡,与单独用药相比,联合用药更能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡(P<0.05); 3. RT-PCR结果表明,在HU作用下,K562、KT-1/A3R细胞与对照组相比,GSTPi基因表达显著下调(P<0.05)；4. Western blotting结果表明,HU可下调K562、KT-1/A3R细胞的GSTPi的蛋白质水平(P<0.05)。结论：1.HU及HU联合IFN-α均能显著抑制CML细胞增殖,并诱导细胞凋亡；HU联合IFN-α比二者单独使用对CML细胞增殖的抑制效应及诱导CML细胞凋亡的效应更加明显；2. GSTPi的表达水平与K562、KT-1/A3R的干扰素耐药性有关,HU可下调GSTPi表达水平；3.K562、KT-1/A3R细胞对IFN-α耐药,而HU或HU联合IFN-α可缓解K562、KT-1/A3R细胞对IFN-α的抗性,而且联合用药后可以协同抑制K562、KT-1/A3R细胞增殖,促进其凋亡。