多官能团修饰亲水色谱填料的制备与评价

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亲水作用色谱作为反相色谱的补充,可以很好地分离亲水性化合物,已经被广泛应用于蛋白组学、糖组学、环境科学和食品分析等各学科。色谱固定相作为色谱技术的核心,其发展密切影响着色谱的应用和发展。虽然目前有一些商品化的亲水色谱固定相,但是,具有高亲水性、独特选择性和多种保留模式的新型色谱固定相的研发仍然意义重大。本论文在文献调研的基础上,制备了两种新型HILIC固定相,并对它们的色谱分离性能及分离机理进行了研究。同时,合成了一种硅胶基质的有机酸的固相萃取填料。本论文主要包括以下研究内容:1.通过直链四肽(-Ala-Ala-Ala-Glu-)的羧基与氨丙基硅胶的氨基相互作用将直链四肽嫁接至硅胶表面,合成了一种亲水作用色谱固定相。研究了流动相水含量、pH、盐浓度和柱温对物质保留的影响。该固定相可以快速分离核苷类、磺胺类和取代苯甲酸类化合物。同时,该固定相还可以用于分离同分异构体,如被硝基、氨基或羟基取代的苯甲酸类化合物同分异构体的分离。与环肽固定相的色谱行为进行比较发现,直链四肽固定相的亲水性强于环肽固定相,而环肽固定相因其含有14个碳原子环的存在,对分析物表现出特有的大小选择性。2.利用多巴胺在碱性条件下的自聚合反应将其聚合在活化硅胶表面,合成了聚多巴胺修饰的硅胶固定相,利用元素分析和热重等对其进行了表征。按照Bicker等人的方法测定了该新合成的固定相水富集层的体积。通过研究流动相水含量、柱温、pH和盐浓度对测试化合物的保留时间的影响,阐述了该固定相在HILIC模式下的保留机理和特点。通过向流动相中加入胺改性剂和与裸硅胶柱进行比较,发现聚合在硅胶基质表面的聚多巴胺层可以很好地掩蔽硅羟基,避免了硅羟基与分析物的次级作用力。与MN公司生产的HILIC柱进行比较发现,新合成的色谱柱表现出更强的亲水性。与商品化的裸硅胶固定相和亲水色谱固定相进行比较,发现新合成的固定相对红花注射液中水溶性成分的分离效果最好,可见该固定相可以用于实际样品的分离分析。3.以硅胶为基质,合成了一种含有叔胺、仲酰胺和伯胺三种类型官能团的吸附剂。该多类型氨基修饰硅胶吸附剂可以用来特异性吸附芳香酸。实验发现,该吸附剂对芳香酸的吸附速度快、吸附量大、解吸容易且回收率高,可以用来对芳香酸进行特异性吸附去除和回收。
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