【摘 要】
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目的:本研究选用MCAO模型大鼠,以脑梗死炎症靶点为研究对象,选择针刺并用补阳还五汤为干预手段,通过观察针药并用对MCAO模型大鼠脑梗死面积、脑梗死炎症相关因子的影响,采用网络拓扑学计算手段,探究针药并用对脑梗死炎症靶点的影响及靶点之间的相互作用关系。方法:采用SPF级SD大鼠250只,运用随机数字表法分为假手术组50只,造模组200只;造模按大脑中动脉栓塞法（middle cerebral ar
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目的:本研究选用MCAO模型大鼠,以脑梗死炎症靶点为研究对象,选择针刺并用补阳还五汤为干预手段,通过观察针药并用对MCAO模型大鼠脑梗死面积、脑梗死炎症相关因子的影响,采用网络拓扑学计算手段,探究针药并用对脑梗死炎症靶点的影响及靶点之间的相互作用关系。方法:采用SPF级SD大鼠250只,运用随机数字表法分为假手术组50只,造模组200只;造模按大脑中动脉栓塞法（middle cerebral artery occlusion,MCAO）造模,造模成功后二次随机将200只大鼠分为模型组50只、针刺组50只、药物组50只、针药组50只。针刺组、假手术组、针药组进行针刺,药物组只给药、固定而不针刺,模型组只固定不针刺,固定与针刺操作均为每次20min,每日2次。药物组、针药组、假手术组进行灌胃,每天1次。每组各分1d、3d、5d、7d、14d五个时间点进行取材,每个时间点随机取10只,每组雌雄各半,随机抽取4只检测脑组织梗死面积,6只检测炎症相关靶点（TNF-α、IL-6、IL-1β、ICAM-1、MMP-9、p38、CCL2、HMGB1）、运用质量作用定律构建的数学模型计算8个靶点作用大小及靶点相互关系。结果:1.脑梗死面积:针刺与药物并用干预后脑梗面积逐渐减少（p＜0.05）;术后第5d针药组脑梗面积明显较针刺组减少（p＜0.05）,术后第14d针药组脑梗面积明显较针刺组、药物组减少（p＜0.05）;2.炎症相关指标检测:针药组术后脑组织CCL2、IL-6含量随时间累积较模型组含量更低（p＜0.05）;针药组术后第1d、3d脑组织MMP-9、ICAM-1含量较模型组含量更低（p＜0.05）;针药组术后第7d、14d脑组织HMGB1、P38、TNF-α含量较模型组含量更低（p＜0.05）;针药组在术后各时间节点脑组织IL-1β含量较模型组、针刺组、药物组差异无统计学意义（p＞0.05）。相较于模型组,药物组在前期（1-5d）更能有效降低p38、TNF-α、HMGB1这三个靶点含量（p＜0.05）,针药组则在后期（7-14d）,相较于针刺与药物组,更有效降低p38、TNF-α、HMGB1这三个靶点含量（p＜0.05）。针刺组在前期（1-3d）更能有效降低CCL2这个靶点含量,针药、药物组则在后期（7-14d）相较于针刺组,更有效降低CCL2这个靶点含量（p＜0.05）。3.网络靶点拓扑学分析:ICAM-1在网络中作用强度最大,在网络中p38、HMGB1、ICAM-1、CCL2这四个靶点为正向作用,TNF-α、MMP-9、IL-6、IL-1β为负向作用,在网络中靶点正向作用关系最强的是IL-6与MMP-9,负向作用关系最强的是p38与IL-1β。各靶点的作用系数均较离散,表明脑梗死后,研究的8个靶点地位相同,并均匀分散。结论:1.针刺并用补阳还五汤能有效减少大鼠脑梗死面积。2.在网络靶点中,ICAM-1的浓度改变对整体靶点浓度扰动大。在相同靶点浓度下,CCL-2、IL-1β对整体靶点扰动的效应最强。在拓扑学拟合分析中显示,p38、HMGB1、ICAM-1、CCL2靶点含量变化会影响到TNF-α、MMP-9、IL-6、IL-1β这四个靶点,提示靶点间存在特定的相互作用机制,调节特定靶点可引起另一靶点的改变,在药物研发、机制阐明方面具有意义。3.针药并用在针对促炎细胞因子、炎症趋化因子两个方面具有协同作用,疗效较单用针刺/补阳还五汤组效果更好。在本次试验中,针药并用对除以上2个方面外,对其余炎症阶段亦有较好疗效,针药并用治疗脑梗死值得在临床中推广。
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