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植物磺肽素α(Phytosulfokine-α,PSK-α)是近些年新发现的一种多肽类植物内源激素,由一个五肽和两个硫磺基团组成,它广泛存在于大多数植物中,具有促进细胞分裂和分化,促进植物遗传转化,调节花粉萌发以及提高植物抗性等多种重要的生理功能。而目前PSK-α的合成主要有化学合成和生物合成两种方法,其中,五肽的磺化是合成的关键因素。本研究的主要目的是利用化学和生物(酶法)的方法将硫磺基团加入到已有的五肽上,同时将获得的PSK-α应用于目前国内研究相对较少的植物抗衰老和植物快繁两个领域,证明了其生理功能。本研究主要开展了下面几个方面的工作:
1.利用化学方法,将硫磺基团加入到五肽上,对产物进行了分离纯化以及质谱分析,最终获得了目的产物PSK-α;并引入了金属。Na+对磺化过程的稳定性进性了比较。
2.通过查阅大量文献资料发现在某些生物体中存在着一种磺基转移酶,利用酶的化学反应轻松将所需要的硫磺基团转移到酪氨酸的苯环上,从而实现PSK-α的生物学活性。这样,我们查阅到了对人体有益的一种乳酸菌—植物乳杆菌(L.plantarum),从它的基因组中克隆出磺基转移酶的基因片段,但是此基因片段存在着大量的非限制性片段干扰。
3.用获得的PSK-α对莴苣离体叶片进行了抗衰老实验,研究了PSK-α对莴苣离体叶片衰老过程中抗氧化酶系统(H2O2含量,SOD酶,CAT酶,Apx酶活性)以及衰老指标(MDA,叶绿素,蛋白质含量)的影响。发现一定浓度的PSK-α能够明显提高莴苣离体叶片的抗衰老能力。
4.用获得的PSK-α对小麦成熟胚和非洲菊离体叶片进行了组培实验,研究了PSK-α对小麦成熟胚和非洲菊离体叶片愈伤组织生长情况的影响,测定了其出愈率和鲜重等指标。发现一定浓度的PSK-α能够提高其出愈率和鲜重。