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磷是生物重要的营养元素之一,在陆地生态系统,特别是农田生态系统中,土壤可溶性磷(Pi)普遍偏低,人们需要施加大量磷肥来补偿可溶性磷的固定和流失。微生物在植物适应土壤可溶性磷浓度偏低的环境中发挥着重要作用。深色有隔内生真菌(Dark Septate Endophytes,DSE)是一类分类和生态学功能都不甚明确、在胁迫环境中常见的定殖于植物根部的小型内生真菌,已有研究表明DSE可能有多种生态学功能,它们可以为宿主植物提供各种无机元素和帮助植物利用有机营养物,但是目前鲜有文献报道DSE吸收、转运磷的机制。磷酸盐转运蛋白(Phosphate Transporter是从植物到细菌体内普遍存在的参与磷酸盐转运过程的一个重要家族的转运蛋白,已有的研究表面磷酸盐转运蛋白分为高亲和力和低亲和力两类。目前真菌中只有少数几个物种的磷酸盐转运蛋白基因得到了克隆并验证了功能,DSE中有关磷酸盐转运蛋白基因的克隆和功能的研究还尚未见报道。研究DSE中磷酸盐转运蛋白的功能有助于揭示DSE磷营养的分子机理,从而为从基因水平上探讨DSE的生态学功能、以及为下一步研究DSE促进植物磷吸收提供理论基础。本研究以深色有隔内生真菌(DSE)中的嗜鱼外瓶霉(Exophiala pinsciphila,H93)为实验材料,以其转录组测序分析结果为基础,克隆得到了EpPT1、EpPT2、EpPT3和EpPT4四个磷酸盐转运蛋白基因的cDNA编码序列,并对其中的两个基因的功能进行了初步研究,取得的主要结果如下：1.磷酸盐转运蛋白基因的克隆以H93菌株转录组测序结果为基础,对其中标注为磷酸转运蛋白的基因进行生物信息学分析,取EpPT1、EpPT2、EpPT3和EpPT4四个基因为目的基因,从H93菌株cDNA克隆了这四个基因的编码序列,通过与转录组测序结果进行比对,验证了所得到的基因序列。2.EpPTl和EpPT2基因的功能验证利用酵母异源表达系统对EpPT1和EpPT2基因cDNA-ORF区所编码蛋白的功能研究结果表明,EpPTl和EpPT2所编码蛋白能够与缺失磷转运蛋白PH084的酵母突变体实现互补,其中转入EpPT1基因的酵母生长表现要优于转入EpPT2基因的酵母,说明EpPT1和EpPT2可以在缺陷型酵母中发挥磷转运的功能。且在低磷条件下,EpPTl编码蛋白的磷酸盐转运能力明显强于EpPT2编码蛋白的磷酸盐转运能力。