【摘 要】
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为探讨高脂肪日粮摄入对动物肠道屏障结构和功能造成的损伤以及粪菌移植后对受损肠道屏障修复作用,为全球“无抗”、“禁抗”背景下动物健康养殖提供理论依据和基础数据。本研究以8周龄清洁级雌性KM小鼠做为模型,试验分为两部分:第一部分试验为制造肠道损伤模型,研究日粮脂肪水平对肠道屏障的损伤。选择60只小鼠,随机分为3组,其中正常饲喂组（ND组）、高脂饲喂组（HD组）、饥饿饲喂组（LD组）各20只。HD组采食
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为探讨高脂肪日粮摄入对动物肠道屏障结构和功能造成的损伤以及粪菌移植后对受损肠道屏障修复作用,为全球“无抗”、“禁抗”背景下动物健康养殖提供理论依据和基础数据。本研究以8周龄清洁级雌性KM小鼠做为模型,试验分为两部分:第一部分试验为制造肠道损伤模型,研究日粮脂肪水平对肠道屏障的损伤。选择60只小鼠,随机分为3组,其中正常饲喂组（ND组）、高脂饲喂组（HD组）、饥饿饲喂组（LD组）各20只。HD组采食高脂饲料,ND组小鼠与LD组采食普通饲料,HD组小鼠和ND组小鼠自由采食（约6g/d/只）,LD组小鼠饲喂量为60%ND组（3.6g/d/只）,饲养期为6周,其中前2周为预饲期,后4周为正饲期。第二部分试验为肠道屏障损伤的修复,研究粪菌移植和转变日粮对损伤肠道屏障的修复效果。选择40只小鼠,随机分为两组,每组20只,分为粪菌移植组（FMT组）和转变饮食组（HDN组）,移植的粪菌来自采食常规饲料小鼠的粪菌,小鼠饲养期为8周,其中前2周为预饲期,后6周为正饲期（3-6周各组饲喂高脂饲料,7-8周FMT组饲喂高脂饲料并作粪菌移植、HDN组饲喂常规饲料）,饲养标准如第一部分。试验结束后,称重并每组随机选择6只小鼠进行解剖,观察小肠组织形态变化及测定空肠微生物多样性和功能基因在肠道屏障变化中的表达量。结果表明:1)高脂饲料摄入会显著增加小鼠体重,粪菌移植并饲喂高脂饲料会限制小鼠的体重增加。HD组增重极显著高于正常饲喂组（P＜0.01）,饥饿饲喂体重增加极显著低于正常饲喂组（P＜0.01）;粪菌移植和转变饮食都可以显著增加小鼠体重,但增重量各组之间差异不显著。2)高脂饲料摄入对小鼠肠道组织形态造成损伤,小肠各段绒毛高度（VL）极显著变短（P＜0.01）,空肠隐窝深度（CD）极显著增加（P＜0.01）,空肠和回肠绒毛高度/隐窝深度（V/C）比值极显著降低（P＜0.01）;而饥饿有益于小鼠肠道组织形态,空肠和回肠VL极显著增加（P＜0.01）,十二指肠和回肠V/C比值极显著增加（P＜0.01）。粪菌移植和转变饮食都可以改善受损的肠道组织形态,粪菌移植可以使受损伤的小肠各段VL显著增加（P＜0.01）,空肠和回肠V/C比值极显著增加（P＜0.01）;转变饮食可以使受损伤的十二指肠和空肠VL极显著增加（P＜0.01）,空肠和回肠V/C比值显著增加（P＜0.05）。3)高脂摄入和饥饿都会使空肠中Bacteroidota丰度显著下降、Firmicutes丰度显著上升（P＜0.05）,HD组在科水平上Lachnospiraceae、Bacteroidaceae丰度显著上升;Prevotellaceae丰度极显著降低（P＜0.01）,LD组Lactobacillaceae、Muribaculaceae丰度显著上升（P＜0.05）,Prevotellaceae、Lachnospiraceae丰度显著下降（P＜0.05）。粪菌移植和转变饮食都会使空肠中Bacteroidota丰度显著上升、Firmicutes丰度显著下降（P＜0.05）;FMT组中Bacteroidaceae、Prevotellaceae、Helicobateraceae、Tannerellaceae丰度显著上升（P＜0.05）,Lachnospiraceae、Deferribacteraceae丰度显著下降（P＜0.05）,HDN组Bacteroidaceae丰度显著上升（P＜0.05）,Lachnospiraceae、Lactobacillaceae、Deferribacteraceae丰度显著下降（P＜0.05）。4)HD组中空肠ZO-1、Claudin-1、Occludin m RNA表达量极显著降低（P＜0.01）,IL-1α、IL-1β、TNF-αm RNA表达量极显著增加（P＜0.01）。LD组中空肠ZO-1、Claudin-1、Occludin、IL-1α、IL-1βm RNA表达量极显著增降低（P＜0.01）。FMT组中空肠ZO-1、Occludin、Claudin-1和MUC2的m RNA表达量极显著增加（P＜0.01）,极显著降低了TNF-α、IL-1β、IL-1αm RNA表达量（P＜0.01）。HDN组中空肠Occludin的m RNA表达量显著增加（P＜0.05）,TNF-α、IL-1β、IL-1αm RNA表达量极显著降低（P＜0.01）。综上所述,在本试验条件下,高脂饲喂不利于动物肠道组织保持正常形态,可显著损伤肠道屏障结构,影响其正常功能;适度饥饿饲喂有益于肠道组织形态,增强肠道免疫屏障功能,但能降低动物肠道紧密连接结构;粪菌移植和转变饮食都能有效改善或缓解高脂饲料摄入对肠道屏障造成的损伤,但粪菌移植的效果优于转变饮食的效果。
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