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一品红(Euphorbia pulcherrima Willd)为大戟科大戟属植物,别名圣诞红、圣诞花,是国内外最重要盆花之一。世界年产量在2亿盆以上,自然花期在元旦前后,利用常规育种手段不能改变自然花期,生产上通常采用花期调控技术来达到周年供应的目的,但需要现代温室设施投入和大量能源消耗。采用基因工程技术转入与开花相关的基因来调控开花基因的表达,是今后一品红品种花期改良的重要途径。试验以一品红嫩叶为外植体,从愈伤组织诱导、根、芽器官分化等方面开展研究,建立了一品红植株再生体系;在此基础上,以一品红‘天鹅绒’胚性愈伤组织为外植体,利用根癌农杆菌介导法,开展了将拟南芥花分生组织特异相关基因AP1基因转入一品红的研究,主要研究结果如下:(1)通过对最适外植体、不同灭菌时间及抗褐化添加剂的筛选,以及不同植物生长调节物质组合对愈伤组织诱导、芽诱导和根诱导效应的研究,建立了稳定的一品红再生体系。其中,一品红愈伤组织诱导的最优培养基为:MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ 2,4-D 0.5 mg/L+Vc 0.05g/L ;诱导愈伤组织芽发生的最适宜培养基为:MS+NAA 0.5 mg/L或6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+Vc 0.05g/L;诱导根分化的最有效培养基为:1/2MS+ NAA 1.0mg/L+ IBA 1.0mg/L+Vc 0.05g/L;壮苗培养中采用1/2MS+NAA 0.5mg/L+IBA0.5mg/L培养基,效果较好。(2)基于所建立的一品红再生体系,以高质量愈伤组织为主要转化受体,进行AP1基因的遗传转化。详细探讨了头孢霉素、羧卞青霉素对一品红外植体生长和农杆菌抑菌效果的影响,优化了转化条件,即选用头孢霉素300 mg/L、羧卞青霉素250 mg/L作为抑菌剂,选用30mg/L的卡那霉素作为筛选浓度。最后,采用GUS染色和PCR检测,发现抗性愈伤组织上的不同部分呈现深蓝色,转基因材料DNA在引物1扩增出约700bp的片段,引物2和3处,分别扩增出约400bp片段,进一步目表明目标基因已经转入一品红基因组中。