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目的:探讨亨廷顿蛋白(HAP1)基因对乳腺癌MCF-7细胞放射生物学特性的影响。方法:构建稳定表达HAP1基因的MCF-7/HAP1和空载体MCF-7/Pb的细胞株,经嘌呤霉素筛选及实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot实验鉴定,建立稳定表达HAP1基因的MCF-7/HAP1和空载体MCF-7/Pb的细胞株。应用平板克隆形成实验检测HAP1基因过表达对MCF-7细胞放射敏感性的影响,同时应用流式细胞术检测HAP1基因联合照射对细胞凋亡的影响。Western blot实验检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。结果:成功建立MCF-7/Pb和MCF-7/HAP1稳定表达细胞株,平板克隆形成实验结果显示,转染HAP1基因并给予不同剂量照射后细胞集落形成能力明显下降,随着剂量的增加,下降更为明显;在同一照射剂量下,转染HAP1基因组细胞的集落形成能力最低。流式细胞实验结果显示单纯照射组或单独转染HAP1基因组都可以使细胞凋亡率增加,而HAP1基因联合照射组的作用更为明显,各组之间有显著性差异(P<0.05)。Western blot实验结果显示,单纯照射组、单独转染HAP1基因组及联合照射组较对照组细胞Bcl-2蛋白表达减少,同时Bax蛋白表达增多,且联合照射组细胞Bcl-2蛋白表达低于其它各组,Bax蛋白表达明显高于其它各组。结论:HAP1基因可能通过诱导乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡,下调Bcl-2及上调Bax,增加人乳腺癌细胞的放射敏感性。目的:研究HAP1基因对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及作用机制。方法:取对数期生长期已构建好的MCF-7/HAP1和MCF-7/Pb稳转细胞株(5×106),接种于5周龄BALB/C雌性裸鼠左腹股沟部皮下,建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,21d裸鼠皮下肿瘤长径到达0.6-0.9cm时,分为4组(n=6):MCF-7/Pb组,MCF-7/HAP1组,MCF-7/Pb+照射组,MCF-7/HAP1+照射组。照射组在第21天给予5 Gy X线照射一次后继续饲养3周左右。期间每隔4天用卡尺测量1次肿瘤的长径及短径,计算肿瘤体积。第6周时处死各组裸鼠并取出肿瘤统计瘤重。免疫组织化学方法分析Bcl-2和Bax表达,TUNEL实验分析细胞凋亡。结果:MCF-7/HAP1+照射组裸鼠肿瘤生长明显迟缓,平均体积小于其他3组(P均<0.01);MCF-7/HAP1+放射组平均瘤重明显小于其他3组(P均<0.01)。TUNEL凋亡实验结果显示:MCF-7/Pb组细胞平均凋亡率为8.90±1.37%,MCF-7/HAP1组为34.43±1.67%,MCF-7/Pb+照射组为55.03±0.49%,MCF-7/HAP1+照射组为81.73±1.87%。体内实验表明MCF-7/HAP1+照射组凋亡率明显高于其他3组(P<0.05)。通过免疫组织化学实验的染色评分结果显示:MCF-7/Pb组,MCF-7/HAP1组,MCF-7/Pb+照射组,MCF-7/HAP1+照射组中凋亡蛋白Bcl-2平均积分分别为13.33±1.89,7.67±1.25,8.67±0.47,4.67±1.89,凋亡蛋白Bax平均积分分别为1.67±0.47,4.00±1.63,7.00±1.41,14.67±1.89。通过本实验说明Bcl-2在MCF-7/HAP1+照射组中的水平明显低于其他3组(P<0.05),而Bax明显高于其他3组(P<0.05)。结论:HAP1基因可能通过调控肿瘤细胞的凋亡来增强人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的放射敏感性。