【摘 要】
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目的1.建立和完善大鼠脑皮质小胶质细胞原代培养的实验方法和条件；2.探索原代培养的小胶质细胞经脂多糖(LPS)体外激活后对神经元细胞的影响；3.通过丁基苯酞(NBP)对小胶质细胞激
【出 处】
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北京协和医学院(中国医学科学院) 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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目的1.建立和完善大鼠脑皮质小胶质细胞原代培养的实验方法和条件；2.探索原代培养的小胶质细胞经脂多糖(LPS)体外激活后对神经元细胞的影响；3.通过丁基苯酞(NBP)对小胶质细胞激活过程的影响,探讨国家Ⅰ类新药NBP可能的新的作用靶点。方法原代培养大鼠脑皮质小胶质细胞和神经元细胞；利用LPS刺激小胶质细胞,建立原代培养的小胶质细胞体外激活的细胞模型；提取LPS激活的小胶质细胞的培养基上清液作用于神经元细胞,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)检测神经元细胞的存活率：在加入LPS作用前用NBP处理小胶质细胞,通过观察小胶质细胞的形态,ELISA法定量检测炎性因子IL-1β、TNF-α及IL-10的释放,硝酸还原法检测炎性介质一氧化氮(NO),以及MTT检测神经元细胞经其培养基上清液作用后的存活率,综合评估NBP对小胶质细胞激活的影响。结果成功培养出数量多、纯度高的大鼠脑皮质小胶质细胞：LPS激活的小胶质细胞的培养基上清液可致神经元细胞的存活率下降；NBP处理后的小胶质细胞经LPS作用后,仍呈现为激活形态,其释放的NO减少,IL-1β、TNF-α及IL-10的含量无明显变化,经其培养基上清液作用后的神经元细胞存活率较对照组升高,且丁基苯酞的上述作用呈现一定的剂量依赖性。结论激活的小胶质细胞对神经元细胞起毒性作用；NBP不能抑制小胶质细胞的激活,但能通过抑制激活的小胶质细胞生成N0,从而减轻激活的小胶质细胞对神经元细胞的毒性作用,并具有剂量依赖性。
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